[发明专利]一组新型酯酶及其应用有效
申请号: | 201711009481.2 | 申请日: | 2017-10-25 |
公开(公告)号: | CN109706133B | 公开(公告)日: | 2022-12-27 |
发明(设计)人: | 杨广宇;马富强;冯雁;栗林胜男;钟孟庭 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N9/18 | 分类号: | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12P41/00;C12P7/40 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 王正君;马思敏 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 新型 及其 应用 | ||
1.一种酯酶,属于α/β水解酶家族,其催化活性中心包含有“丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸”催化三联体,其特征在于,所述酯酶在SEQ ID No: 2的基础上发生以下位置的突变,
所述的突变选自:
(2)第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第41位谷氨酸被赖氨酸取代+第209位异亮氨酸被缬氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第302位天冬酰胺被丝氨酸取代;
(3)第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第41位谷氨酸被赖氨酸取代+第209位异亮氨酸被缬氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代;
(5)第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第209位异亮氨酸被缬氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第216位丝氨酸被甘氨酸取代;
(6)第8位脯氨酸被亮氨酸取代+第11位酪氨酸被天冬酰胺取代+第37位天冬酰胺被丝氨酸取代+第211位天冬氨酸被甘氨酸取代+第216位丝氨酸被甘氨酸取代+第302位天冬酰胺被丝氨酸取代。
2.根据权利要求1所述的酯酶,其特征在于,所述酯酶对以2-芳基丙酸类分子具有立体选择性。
3.一种多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸编码如权利要求1-2所述的任一酯酶。
4.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含有权利要求3所述的多核苷酸。
5.一种基因工程化的细胞,其特征在于,所述的细胞包括权利要求4所述的表达载体或其基因组中整合有权利要求3所述的多核苷酸。
6.一种手性分子的拆分方法,其特征在于,在生物酶法催化系统中,将如权利要求1-2任一所述的酯酶作用于消旋体底物,所述的消旋体底物为2-芳基丙酸类分子的酯类衍生物。
7.一种权利要求1-2任一所述的酯酶的用途,其特征在于,用于制备非甾体类抗炎药,所述酯酶用于催化2-芳基丙酸分子的酯类衍生物,从而获得非甾体类抗炎药。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述的非甾体类抗炎药为单一构型手性产物。
9.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述非甾体类抗炎药为S型或R型布洛芬类化合物。
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