[发明专利]一种利用长链非编码RNA检测膀胱癌的试剂盒

说明书

本发明公开了一种利用长链非编码RNA检测膀胱癌的试剂盒，所述试剂盒包括：如SEQ ID No.2所述的上游引物和SEQ ID No.3所述的下游引物；探针；包含SEQ ID No.1所述核酸序列的标准DNA模板；PCR反应液。本发明的利用长链非编码RNA检测膀胱癌的试剂盒，选择长链非编码RNA lncRNA‑TMP125对膀胱癌组织的检测，对膀胱癌的检测效果好，具有较高的灵敏度和特异性。

技术领域

本发明涉及检测试剂盒技术领域，具体涉及一种膀胱癌基因检测试剂盒。

背景技术

膀胱癌为泌尿系最常见的恶性肿瘤，在我国发病率居泌尿系统肿瘤的第一位。膀胱癌极易复发，发掘一种能用于早期筛查和预后监测的新型膀胱癌标志物，显得尤为重要。长链非编码RNA(lncRNA)是指长度超过200个核苷酸、具有调控基因表达作用的非编码RNA。研究发现，lncRNA参与了细胞内多种重要生命活动，虽无蛋白质编码功能，但可通过表观遗传修饰调控基因表达，与肿瘤的发生、发展密不可分。近年来，lncRNA与膀胱癌的关系也逐渐受到关注，一些具有极为重要的lncRNA有望成为膀胱癌诊断的生物标志物及治疗的分子靶点。

传统的膀胱癌的检测中，极少用到lncRNA作为检测的标志物，虽然经过大量的研究，但是仍为发现有效的以lncRNA作为检测的标志物，亟待进一步研发一种以lncRNA作为检测标志物的检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用长链非编码RNA检测膀胱癌的试剂盒，用以解决现有技术中存在的对膀胱癌检测的特异性及灵敏度较差的缺陷。

为解决上述技术问题，本发明提供一种利用长链非编码RNA检测膀胱癌的试剂盒，

所述试剂盒包括：

如SEQ ID No.2所述的上游引物和SEQ ID No.3所述的下游引物；

荧光标记物；

包含SEQ ID No.1所述核酸序列的标准DNA模板；

PCR反应液。

优选的，所述PCR反应液包括2×Super TaqMan Onestep Buffer，Super OnestepEnzyme，探针，RNase-Free Water。

优选的，PCR反应体系为25ul反应体系，其中，2xSuper TaqMan Onestep Buffer12.5ul；上游引物，10uM，0.5ul；下游引物，10uM，0.5ul；探针，10pM，0.5ul；Super OnestepEnzyme，1.0ul；RNA Template，10pg-100ng。

优选的，所述标准模板DNA转化到DH5α感受态细胞中，为提取的含有SEQ ID No.1所示序列的质粒。

优选的，所述荧光标记物为SYBR Green、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针或复合探针。

优选的，所述TaqMan探针序列如SEQ ID No.4所示。

优选的，所述试剂盒还包括RNA的提取试剂，所述RNA的提取试剂为Thermo FisherScientific公司的TRIzol试剂。

优选的，所述试剂盒还包括核酸定量仪。

优选的，所述试剂盒还包括荧光定量扩增仪。

本发明具有如下优点：