[发明专利]一种DNA提取装置在审
| 申请号: | 201711001932.8 | 申请日: | 2017-10-24 |
| 公开(公告)号: | CN109694807A | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
| 发明(设计)人: | 吴烨娴;安光明;陈兢 | 申请(专利权)人: | 苏州含光微纳科技有限公司 |
| 主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00 |
| 代理公司: | 北京君尚知识产权代理事务所(普通合伙) 11200 | 代理人: | 邱晓锋 |
| 地址: | 215123 江苏省苏州市工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 储液区 进液口 流道 连通 过滤区 离心盘 离心机 硅胶膜 材料优选 反应流程 吸附法 过滤 背面 | ||
本发明涉及一种DNA提取装置。该DNA提取装置包括离心机和DNA提取离心盘,所述DNA提取离心盘安装在所述离心机上,所述DNA提取离心盘包括至少一个DNA提取单元;所述DNA提取单元的正面设有第一进液口、第二进液口、第三进液口、临时储液区和过滤区,背面设有第一储液区和第二储液区;过滤区内设有DNA吸附材料;第一进液口、第二进液口分别通过流道与过滤区连通;第三进液口通过流道与临时储液区连通,临时储液区通过流道与过滤区连通;第二储液区通过流道与第一储液区连通,第一储液区通过流道与过滤区连通。所述DNA吸附材料优选为硅胶膜。本发明将硅胶膜吸附法的反应流程集成到离心盘上,能够高效地实现DNA提取。
技术领域
本发明属于生物技术、DNA提取技术领域,具体涉及一种DNA提取装置,能够方便高效地实现DNA提取。
背景技术
现有的DNA提取方法主要有以下几种:
1)经典的酚-氯仿法。一般是指细胞裂解后加入等体积的酚氯仿混合液,根据DNA易溶于水,不易溶于有机溶剂的特性,在有机溶剂环境下,蛋白质经过变性沉淀和离心后,有机溶剂存在于试管底层,DNA存在于上层水中,蛋白质沉淀存在于两种液体之间,最后用乙醇将DNA从水中分离,沉淀,离心之后回收。酚-氯仿提取过程中需要多次复杂的离心操作,耗时长,容易造成样品的交叉污染,使得DNA产量偏少,不适合大批量提取。
2)磁珠法。由于磁珠在特定的条件下可特异性地与核酸结合而不与样本中的蛋白、糖类和酯类等杂质结合因而被广泛地应用于核酸提取、病原体检测等方面。磁珠加入到经过裂解后的混合液中,偏酸性(PH 5.0)的缓冲液中,从细胞中游离出来的DNA分子很快被吸附到带有正电荷的磁珠上。吸附有DNA的磁珠在磁场作用下可定向团聚在试管的侧面。此时,吸取并丢弃管中液体,加入洗涤液缓冲液,试管移开磁场,反复冲洗几次后再放入磁场,磁珠又可以团聚在管壁。加入偏碱性(PH 8.0)的缓冲液和洗脱液可以讲DNA从磁珠上洗脱下来,从而得到纯化的基因组DNA溶液。磁珠法提取DNA操作步骤繁琐且提取纯度比硅胶膜吸附法低,全自动的核酸提取仪价格昂贵超出了偏远地区医院以及乡镇卫生院的承受范围。
3)硅胶膜吸附法:该方法采用核酸吸附硅胶膜,其是一种特殊硅基质吸附材料,能够特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下,DNA表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜,以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了DNA表面亲水薄膜的相对有序排列,形成了疏水环境。在此环境中,DNA与硅胶膜能有效结合,而蛋白质、代谢产物和其他污染物则不能结合。在高离子强度缓冲溶液中,硅胶膜上的硅表面的负电荷逐渐减少,从而使DNA分子脱水后暴露的磷酸基团带有的负电荷与硅表面产生的排斥力减少,形成了大量的水合离子,DNA分子的水合程度降低而被驱使聚合到硅的表面上。同时细胞裂解液也会干扰双链DNA分子之间的氢键形成而产生单链的DNA分子,单链DNA分子与硅表面形成氢键,且这种氢键的作用远大于DNA分子与硅表面的静电排斥力。如果高离子强度缓冲溶液的PH值低于硅表面的PKa值,这种静电排斥力会变小,这就大大提高了硅表面对DNA分子的吸附能力,但当缓冲溶液的PH值高于硅表面的PKa值时,硅表面吸附的DNA分子就会被缓冲液洗脱下来。
发明内容
本发明针对上述问题,提供一种DNA提取装置,能够将硅胶膜吸附法的反应流程集成到该离心盘上,高效地实现DNA提取。
本发明采用的技术方案如下:
一种DNA提取装置,包括离心机和DNA提取离心盘,所述DNA提取离心盘安装在所述离心机上,所述DNA提取离心盘包括至少一个DNA提取单元;所述DNA提取单元的正面设有第一进液口、第二进液口、第三进液口、临时储液区和过滤区,背面设有第一储液区和第二储液区;过滤区内设有DNA吸附材料;第一进液口、第二进液口分别通过流道与过滤区连通;第三进液口通过流道与临时储液区连通,临时储液区通过流道与过滤区连通;第二储液区通过流道与第一储液区连通,第一储液区通过流道与过滤区连通。
进一步地,所述DNA吸附材料为硅胶膜。
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