[发明专利]钩吻生物碱作为有毒蜂蜜的生物标志物的应用

权利要求书

1.一种检测蜂蜜中是否含有钩吻有毒蜂蜜的方法，其特征在于，

蜂蜜样本在检测前，进行前处理：取蜂蜜样本加入水中溶解，混匀使蜂蜜完全溶解，利用乙腈提取有机相；

采用UHPLC-HRMS检测蜂蜜样本，通过查看其图谱中是否含有钩吻素甲和钩吻素己的特征峰，判定蜂蜜是否为有毒蜂蜜；

钩吻素甲在UHPLC-HRMS的精确提取粒子流色谱图中含有m/z323.17595([M+H]⁺)准分子离子峰，其精确质量数的误差应当小于5ppm；钩吻素己在UHPLC-HRMS的精确提取粒子流色谱图中含有m/z327.17087([M+H]⁺)准分子离子峰，其精确质量数的误差应当小于5ppm；

此外，钩吻素甲的MS/MS图谱中应含有碎片离子m/z 70.06589、m/z 86.06054、m/z159.08033、m/z 236.10679和m/z 262.12221；钩吻素己的MS/MS图谱中应含有碎片离子m/z71.07370、m/z 143.07291、m/z 225.10174、m/z 265.13335和m/z 296.15195；上述MS/MS图谱中碎片离子的精确质量数误差应当小于5ppm；

采用UHPLC-Q Exactive plus对蜂蜜样本进行检测时的液相条件如下：化合物的分离采用C18色谱柱，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为B，采用梯度洗脱程序分离：0-1.0min，5％的B；1.0-2.0min，5-20％的B；2.0-6.5min，20-50％的B；6.5-7.0min，50-80％的B；7.0-7.1min，80-100％的B；7.1-8.5min，100％B；8.5-8.6min，100-5％的B；8.6-10min，95％的B；液相的流速为0.30mL/min；进样量为3.0uL。