[发明专利]缺氧诱导的有丝分裂因子的蛋白检测试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种缺氧诱导的有丝分裂因子的蛋白检测试剂盒及其应用，该蛋白检测试剂盒包括特异性缺氧诱导的有丝分裂因子抗体包被的酶标板、酶标试剂、洗涤缓冲液、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、缺氧诱导的有丝分裂因子标准品，所述缺氧诱导的有丝分裂因子抗体起诊断作用的活性成分。本发明经过细胞水平及动物水平实验得到不但能够参与心肌梗死性疾病的发生，而且能够与心肌梗死的程度密切相关的生物标记物HIMF蛋白检测ELISA试剂盒，该HIMF蛋白检测ELISA试剂盒，对于多种心肌梗死性疾病，如急性心肌梗死、陈旧性心肌梗死等具有明显的诊断效果；对于心肌梗死引起的心室重构表现出优异的诊断作用。

技术领域

本发明涉及检测试剂盒的技术领域，更具体地说，涉及一种缺氧诱导的有丝分裂因子的蛋白检测试剂盒及其应用。

背景技术

近年来，我国心血管疾病死亡一直占城乡居民总死亡原因的首位，其中，心肌梗死患病率及死亡率总体处于持续上升态势。心肌梗死是一个极其复杂的病理生理过程，在发展为心力衰竭的过程中，左心室大小、形态、组织结构、功能状态发生进行性的梗死后心室重构，贯穿于整个病程的始终，是影响心血管疾病患者预后的主要因素之一。临床上心肌梗死的死亡率极高，早期诊断是及时治疗、改善预后的首要前提。

近20年来，临床上主要利用多普勒超声设备结合高频探头来评价个体的心血管生理功能及心脏结构特征，并且作为心功能评价的金标准。但是，凡是利用多普勒超声诊断心功能障碍的患者，其心功能受损程度必须达到一定水平，心功能受损发展过程中尚且需要经历相当长一段时间，而该时间段内心功能的临床诊断尚处于空白阶段，因此了解心肌梗死性疾病的分子特征并根据分子病理特征筛选出有效的生物标记物，对于心肌梗死性疾病的有效诊断意义重大。

在现有技术中众多的心血管生物标记物之中，何种生物标记物既可以特异性地表达于心肌梗死的早期阶段，同时还能够与心肌梗死的程度密切相关，本领域需要进一步的深入研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种缺氧诱导的有丝分裂因子的蛋白检测试剂盒及其应用，解决了现有技术中早期心肌梗死无法有效诊断的问题。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)的蛋白检测试剂盒，包括特异性缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)抗体包被的酶标板、酶标试剂、洗涤缓冲液、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)标准品，所述缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)抗体起诊断作用的活性成分。

在本发明的蛋白检测试剂盒中，所述蛋白检测试剂盒包括其诊断学上可接受的ELISA试剂盒。

本发明还提供一种上述的蛋白检测试剂盒的检测方法，包括如下步骤：

S1、加入缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)标准品和样本至对应的特异性缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)抗体包被的酶标板的微孔内，使缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)标准品和样本中的缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)蛋白与酶标板中的抗体充分结合，并洗去未结合的杂质；

S2、加入酶标试剂，使已经结合的缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)与辣根过氧化物酶(HRP)标记的缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)单克隆抗体结合，洗去未结合酶标抗体的杂质；

S3、加入显色剂A液和显色剂B液，充分混匀，加入终止液终止反应，利用酶标仪检测OD值。

本发明还提供一种缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)的蛋白检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

S1、使用生物传感器对抗缺氧诱导的有丝分裂因子(HIMF)单克隆抗体识别的表位进行鉴定，确定抗体识别的抗原表位的空间位置关系；