[发明专利]一种巴戟天低聚糖成分的鉴别方法

说明书

本发明提供了一种基于UPLC‑QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鉴别方法。包括：制备样品溶液及对照品溶液；采用UPLC‑QTof/MS进行检测，根据检测结果，确定巴戟天低聚糖成分。本发明优化了巴戟天药材低聚糖的色谱和质谱分离和检测条件，利用Acquity UPLC BEH Amide C18柱，通过UPLC‑QTof/MS检测系统，成功分离并鉴定了巴戟天药材中19个低聚糖成分，为巴戟天创新药物开发研究提供科学依据。

技术领域

本发明属于中药化学成分分析技术领域，具体涉及一种基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鉴别方法。

背景技术

中药巴戟天为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的干燥根，主产于广东、福建、广西、海南等地，是传统补肾阳的良药，为四大南药之一，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿功效。巴戟天主要含有糖类、脂类、蒽醌、有机酸等成分。目前，从巴戟天药材中分离鉴定的糖类成分有果糖、蔗糖、巴戟甲素、蔗果三糖、耐斯糖、IF-果呋喃糖基耐斯糖、菊粉二糖至七糖。低聚糖因其广泛的生物活性是目前研究热点之一，但是目前对巴戟天中药效显著的低聚糖糖产品的研发相对滞后，低聚糖的鉴定主要采取提取、分离和纯化或衍生化后，再利用核磁共振谱、质谱等方法鉴别，实验耗时长，费用大；并且未见有对巴戟天低聚糖成分进行全面表征的研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鉴别方法。

本发明所提供的基于UPLC-QTof/MS的巴戟天低聚糖成分的鉴别方法，包括下述步骤：

1)制备样品溶液及对照品溶液：

将巴戟天的根干燥、粉碎、过筛，用甲醇水溶液超声提取，离心，收集上清液，将上清液过滤，得到样品溶液，备用；

用甲醇水溶液将对照品溶解，得到对照品溶液，备用；

2)采用UPLC-QTof/MS进行检测，根据检测结果，确定巴戟天低聚糖成分。

上述方法步骤1)中，所述过筛具体可为过40目筛。

所述甲醇水溶液具体可为体积浓度30％的甲醇水溶液。

所述超声提取在室温下进行。

所述超声提取可进行多次，具体可为2次。

每次超声提取的时间可为30min。

所述离心的条件可为12000g离心10min。

所述过滤可为经0.2μm微孔滤膜过滤。

所述对照品为：1F-果呋喃糖基耐斯糖、D(+)葡萄糖、蔗糖、蔗果三糖以及耐斯糖，纯度均≥98％。

上述方法步骤2)中检测的实验条件如下：

色谱条件：

色谱柱：Acquity UPLC BEH Amide C18(2.1x 100mm，1.7μm)；

流动相A：80％乙腈水溶液(v/v，含0.1％氨水)，流动相B：30％乙腈水溶液(v/v，含0.1％氨水)；

洗脱梯度：0～0.5min(0→0A，即洗脱液是100％的流动相B)，0.5～2.0min(0→10％A)，2.0～2.5min(10％→13％A)，2.5～9.0min(18％→34％A)，9.0～14min(34％→50％A)，14～16min(50％→60％A)，16～18min(60％→60％A)；

柱温35℃；

流速：200μL·min^-1；

进样量：1.0μL。