[发明专利]利用人工淋巴结技术生产单克隆抗体的方法

权利要求书

1.利用人工淋巴结技术生产单克隆抗体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)人工淋巴结的制备；

2)将人工淋巴结移植到免疫缺陷型小鼠体内，给予目标抗原免疫刺激，获得表达目标抗体的B淋巴细胞；

3)分离出步骤2)获得的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选获得产生特异性抗体的单克隆细胞，得单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中人工淋巴结的制备为：将包被了基质细胞和树突状细胞的生物材料移植到小鼠体内，经过目标抗原的免疫后，得人工淋巴结。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中生物材料的移植为移植到小鼠肾盂囊下。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中的小鼠为BALB/c小鼠；经过目标抗原的免疫分4次完成。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，免疫前三次免疫的途径选自皮下、肌肉、腹腔或静脉注射的任一方法，最后一次加强免疫选择腹腔注射或静脉注射。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中免疫缺陷型小鼠为SCID小鼠。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中人工淋巴结的移植为移植到免疫缺陷小鼠的肾脏。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中人工淋巴结移植到免疫缺陷型小鼠体内后分两次给予目标抗原免疫刺激，18～25天后分离产生的B淋巴细胞。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括步骤：4)将步骤3)中筛选的产生特异性抗体的单克隆细胞经扩增、重悬后计数，注射入小鼠腹腔产生腹水，纯化后得单克隆抗体。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述注射入小鼠腹腔的单克隆细胞的浓度为1×10⁷～1×10⁸/ml，每只小鼠的注射量为0.08～0.12ml。