[发明专利]马铃薯茎尖剥离脱毒快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于马铃薯苗培育技术领域，具体涉及一种马铃薯茎尖剥离脱毒快繁方法。

背景技术

马铃薯是我国五大主粮作物之一，其营养丰富、适应性强、产量高，是全球第三大粮食作物，仅次于小麦和玉米。马铃薯含有丰富的蛋白质和碳水化合物，同时还有大量的维生素C、维生素A、维生素B1、B2以及钙、磷、铁等矿物元素。另外，马铃薯还含有维生素B6,能有效防止动脉硬化，因此经常食用马铃薯可以减少脑溢血的发病率。马铃薯营养价值很高，优质淀粉含量约为16.5％，同时马铃薯的淀粉在人体内吸收较慢不会导致段时间内血糖升高过快。马铃薯还含有大量木质素，被誉为人类的“第二面包”。同时马铃薯还含有大量优质纤维素可以促进肠道蠕动，保持肠道水分，有效预防便秘和肠道癌症的发生。

茎尖脱毒快繁培育马铃薯是提高马铃薯产量和品质的有效途径及常用手段，因此对脱毒培养进行优化改进，对于提升马铃薯产量和品质具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、脱毒效果好、存活率高的马铃薯茎尖剥离脱毒快繁方法。

本发明的技术方案是：(1)取一扁平容器存适量自来水，取马铃薯薯块平放于塑料网筐中摊开一层，网筐置于扁平容器上，薯块不直接与水接触；

(2)将一棉被铺盖在塑料网筐之上，遮光，温度控制在20±2摄氏度，完成马铃薯生芽；

(3)选取马铃薯萌发出的3±0.5cm的嫩芽，剪取1.5±0.3cm上端茎段，依次用添加洗洁精自来水清洗7-8min，用水冲洗10遍，用70-75％乙醇消毒10s，1％NaClO消毒5min，用无菌水清洗4遍，随后剥取茎尖；

(4)步骤(3)剥取的茎尖置于第一培养基中培养，茎尖萌发至5±1cm后转入第二培养基中扩繁并进行病毒检测；

(5)采用茎蔓切段方法快速繁殖获得脱毒试管苗；

(6)将扩繁的脱毒试管苗用自来水冲洗干净直接移栽至装有移栽基质的穴盘中，存放于阴凉的室内培养。

传统的马铃薯催芽方式多在马铃薯表面覆盖细沙的方式，细沙覆盖的方式马铃薯嫩芽生长缓慢，嫩芽茎段粗壮，叶片大，不利于剥离芽尖。本发明中将马铃薯放置于装水的扁平容器上，保证湿度，棉被覆盖保温保湿，加上避光的环境，马铃薯嫩芽轴向生长迅速，相邻的茎节间距大，横向生长较常规手段缓慢，此环境下的嫩芽有助于剥取茎尖的操作。

所述步骤(3)中剥取茎尖的方式为，在解剖镜下，将茎尖最上端0.7±0.2mm用解剖刀切下，然后剥离多余2-3片小叶，仅保留1-2个叶原基的0.3-0.5mm茎尖。传统茎尖剥取方法是从马铃薯嫩芽基部到顶部逐片剥离嫩芽上的叶片，剥离到最后剩下两个最小的叶原基，用刀切取下来。本申请的茎尖剥离的方法是一刀取下茎尖最前端的一段，可能包含两个茎节，有四片小叶片，然后在显微镜下，剥离多余的两片小叶，剩余的一对叶原基就是茎尖，本申请的剥取茎尖方法得到的嫩芽茎尖带病毒少。本申请的催芽方式生出的马铃薯嫩芽节间距大，更适合本申请的茎尖剥离方法，极大的提高了茎尖剥离的效率和成功率。

所述第二培养基为MS培养基，所述第一培养基为在MS培养基中加入0.2mg/L IAA,1mg/L GA₃和0.5mg/L ZT，所述移栽基质包括2-3cm的基层和2-3cm的上层，所述基层为田间土和草木灰按照1:1混合而成，所述上层为蛭石。第一培养基中植物激素的添加有利于茎尖的快速生长，移栽基质上层设有蛭石，该设置可省去“炼苗”过程，传统的炼苗过程是将盛有幼苗的培养瓶开放，培养瓶中的培养基同时也暴露于空气中，培养基中的糖分等物质有利于细菌和病毒的生长繁殖，降低幼苗的成活率。本发明中的蛭石层，有效的起到了幼苗由培养瓶向室外环境的过渡作用，并且蛭石的环境可降低幼苗感染的几率。当幼苗对蛭石环境适应后，其进一步生长，适应草炭土和田间土组成的移栽基质基层环境，最终适应正常的室外环境。

本发明具有的优点和积极效果是：由于采用上述技术方案，马铃薯繁殖速度快，操作简单，带病毒少，幼苗成活率高。

具体实施方式

通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的内容并不局限于此。

实施例：

(1)选取秋天收获的无虫蛀无损伤的马铃薯薯块；

(2)取一扁平容器存适量自来水，取马铃薯薯块平放于塑料网筐中摊开一层，然后将网筐置于扁平容器上，薯块不直接与水接触，通过水分蒸发满足马铃薯薯块发芽水分需要；