[发明专利]一种从L-羟脯氨酸发酵液中分离纯化L-羟脯氨酸的方法有效
| 申请号: | 201710978595.1 | 申请日: | 2017-10-19 |
| 公开(公告)号: | CN107513030B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
| 发明(设计)人: | 郭小雷;黄建忠;吴伟斌;翁成光 | 申请(专利权)人: | 福建师范大学 |
| 主分类号: | C07D207/16 | 分类号: | C07D207/16 |
| 代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
| 地址: | 350108 福建省福州*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 羟脯氨酸 发酵 分离 纯化 方法 | ||
1.一种从L-羟脯氨酸发酵液中分离纯化L-羟脯氨酸的方法,其特征在于:其包括以下步骤:
1)发酵液菌液分离:调节L-羟脯氨酸发酵液的pH为2.0-5.0,然后加入L-羟脯氨酸发酵液中L-羟脯氨酸质量0.1-2%的絮凝剂,升温至60-70℃并保温30min,过滤除菌得到过滤清液;
所述絮凝剂为三氯化铁、硫酸铝钾、硫酸铝铵或聚丙烯酰胺中的任意一种;
所述过滤除菌采用孔径为50-200nm的陶瓷膜过滤或采用孔径为30-100nm的有机管式微滤膜过滤;
2)超滤膜过滤:将上述过滤清液泵入超滤膜系统,得到超滤清液,所述超滤膜的截留分子量为3000-10000D;
3)复合吸附剂处理:将超滤清液预热后,加入复合吸附剂于60-70℃保温0.5-1.0 h;所述复合吸附剂为硅藻土与活性炭或活性白土的组合物,所述活性炭的添加量为超滤清液中L-羟脯氨酸质量的10-20%;所述硅藻土的添加量为超滤清液中L-羟脯氨酸质量的0.5-5.0%;所述活性白土的添加量为超滤清液中L-羟脯氨酸质量的0.5-5.0%;
4)除盐:板框过滤除去复合吸附剂得到一级料液,在一级料液中加入一定量的沉淀剂和螯合剂,保温搅拌0.5-1h,得到二级料液;
所述沉淀剂为氧化钙、氢氧化钙、氯化钙、氢氧化钡或氯化钡中的任意一种,沉淀剂的添加量为超滤清液的0.5-3.0%(w/v);所述螯合剂为EDTA或EDTA二钠,螯合剂的添加量为超滤清液的0.01-0.1%(w/v);
5)真空浓缩结晶:将二级料液板框过滤除去沉淀物,得到的三级料液,先将三级料液真空浓缩至L-羟脯氨酸浓度为0.15-0.25kg/L的一级浓缩液,然后加入一级浓缩液中L-羟脯氨酸质量的0.2-2.0%的晶种,继续真空浓缩至L-羟脯氨酸浓度为0.3-0.4kg/L的二级浓缩液,然后降温至5-15℃,冷却结晶,离心收集晶体并在温度50-60℃,真空度-0.08Mpa的条件下双锥真空干燥,得到成品L-羟脯氨酸。
2.根据权利要求1所述的一种从L-羟脯氨酸发酵液中分离纯化L-羟脯氨酸的方法,其特征在于:还包括步骤6)和步骤7),
6)大孔树脂处理:结晶母液经大孔吸附树脂处理,得到大孔树脂流通液;其中,大孔吸附剂骨架为交联聚苯乙烯,其型号是CAD-40,LS-20B,LS-200,LS-300中的任意一种,处理温度为40-60℃,pH值为4.0-7.0;
7)母液浓缩结晶:将大孔树脂流通液真空浓缩,加入晶种,冷却结晶,离心收集晶体,双锥真空干燥,得到L-羟脯氨酸。
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