[发明专利]一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法及工艺

说明书

本发明公开了一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法，其采取一种新型的亚硒酸钠的添加方式，不仅不会影响菌丝的产量，而且大大提高了硒的利用率，使无机硒尽可能的转化为有机硒，减少产品的毒性，具有极高的工业化应用，根据上述结果，调节摇床培养温度为23℃、初始pH为6.0、转速为120 rpm，培养基中含有1.0 g/L硫酸镁、2.0 g/L氯化钠、0.5 g/L磷酸二氢钾、2 g/L亚硒酸钠时，并且我们将亚硒酸钠均分为三等分，分别在发酵第一、二、三天加入培养基中，发酵7天可以获得约11.4 g干重菌丝、富硒量约331.7μg/g，并且有机硒转化率高达90.0%，相对与现存的产品，本发明大大节约了成本，适合现代化工业发展。

技术领域

本发明涉及一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法，属于黄牛肝菌的液体发酵技术领域。

背景技术

我国西南地区由于其独特的地貌和环境特征，蕴含了大量的珍惜植物、动物和食用真菌。如今，食用菌的食药用价值已经得到世界各地的广泛认可，特别是在中国、印度、日本和韩国，这些食用菌已成为重要的中药成分，至少有270种食用菌被研究并确认具有生物活性。同时，食用菌是能量和脂肪含量低，但富含蛋白质、碳水化合物和膳食纤维的营养物质，由于真菌细胞中富含大量非淀粉类多糖，其中β-葡萄糖是最具有功能价值的部分，因此，蘑菇可以作为膳食纤维的潜在来源，此外，食用菌还具有抗癌、抗菌、抗病毒，降血压血脂，降血糖，免疫调节等作用。

牛肝菌类，是牛肝菌科和松塔牛肝菌科等真菌的统称，其中除少数品种有毒或味苦而不能食用外，大部分品种均可食用。我国牛肝菌类资源丰富，主要有白、黄、黑、红牛肝菌。现有的研究表明，黄牛肝菌是最具有抗氧化活性的一类菌种，但是关于黄牛肝菌的培养仍存在较大的困难。

硒为人和动物体内必需的微量元素，是人体内最强的抗氧化酶-谷胱甘肽过氧化酶的重要组成部分，因此，硒与酶的活性密切相关。缺硒会造成部分酶活性降低，导致组织细胞抗氧化损伤能力减弱，直接影响细胞的分裂、繁殖、遗传及生长，进而干扰核酸、蛋白质、多糖及酶的合成及代谢。流行病学研究证明人体的低硒状态与克山病、癌症、心血管病、白内障、糖尿病、艾滋病等多种疾病的发病率密切相关。

土壤缺硒是全世界广泛存在的问题，在我国有72％的国土为不同程度的缺硒区，形成食物链的普遍低硒状态，只靠天然食品补硒难以从根本上改善缺硒状况。同时，研究表明有机硒补剂产品在毒理安全性、生理活性和吸收率上具有优越性，因此这类产品的开发与研究一直广为关注。据最新研究发现，食用菌具有很强的富硒潜能，对有机硒源的开发可通过菌丝细胞的代谢实现硒的有机化。

本发明针对以上问题，提供一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法，其通过对黄牛肝菌富硒培养条件的优化，以获得高效高产的富硒黄牛肝菌菌丝体，实现硒的最大化利用。

发明内容

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种富硒黄牛肝菌的液体发酵工艺优化方法，其特征在于，其包括以下步骤：

(1)选取黄牛肝菌；

(2)培养基的培养：以PDA培养基为基础，同时添加不同的矿质元素来促进菌丝的生长；

(3)培养条件的优化：采用正交实验，优化转速、温度、初始pH这三个变量，其中，装液量为50mL/250mL，接种量为5％，设置多种温度、pH和转速，发酵7d后测定其菌丝生物量，从而选取一个黄牛肝菌菌丝生长的最适条件；

(4)培养基中矿质元素含量的优化：通过正交实验选择一种不同矿质元素的最适含量，其中，添加的矿质元素至少包括硫酸镁、氯化钠、磷酸二氢钾、亚硒酸钠；

(5)富硒条件的优化：将亚硒酸钠按不同的添加时间以及添加方式添加进去，以获得硒的最大转换效率；