[发明专利]一种测定板蓝根药材及其制品中R-告依春和S-告依春含量的方法

权利要求书

1.一种测定板蓝根药材及其制品中R-告依春和S-告依春含量的方法，包括：标准曲线的制作、供试品溶液的制备和含量测定步骤，其特征在于：

a)所述供试品溶液的制备方法如下：

精密称取待测定的板蓝根药材或其制品，用去离子水进行回流提取或超声提取；过滤提取液，将所得滤液上样至固相萃取柱中，先用水冲洗，然后用甲醇洗脱，上样和洗脱过程均需控制流速≤1滴/秒；收集甲醇洗脱液，氮吹至干燥，残渣再用甲醇溶解，过滤，所得滤液即为供试品溶液；

b)所述含量测定采用高效液相-紫外-圆二色谱法，具体测定条件为：采用C18色谱柱，紫外检测器和圆二色检测器；流动相由A相与B相按体积比为10：90～15：85组成，其中A相为100％乙腈，B相是质量浓度为0.02％～0.03％的磷酸水溶液；流动相流速为0.5～1.0mL/分钟；紫外检测波长为230nm，圆二色检测波长为280nm；柱温为30℃；进样量为10μL；采集紫外色谱峰面积A和圆二色谱峰面积ΔA；具体步骤如下：

1)精密称定R,S-告依春对照品适量，用甲醇配制成浓度为0.05～0.6mg/mL的R,S-告依春对照品溶液；

2)采用高效液相色谱柱-紫外检测器测定供试品，采集供试品的紫外色谱峰面积A，并以外标法计算供试品中R,S-告依春的质量含量；

3)采用高效液相色谱柱-圆二色检测器测定供试品，采集供试品的圆二色谱峰面积ΔA，由计算的g＝ΔA/A值和标准曲线，得到供试品中R-告依春的质量百分含量；

4)由得到的R,S-告依春的质量含量和R-告依春的质量百分含量，计算得到R-告依春的质量含量，进而计算得到S-告依春的质量含量，从而实现对供试品中R-告依春和S-告依春这对对映异构体含量的分别测定；

另外，所述标准曲线的制作包括如下步骤：

①对照品溶液的制备

分别精密称定R-告依春对照品和S-告依春对照品适量，用甲醇配制成浓度为0.05～0.6mg/mL的R-告依春对照品溶液和浓度为0.05～0.6mg/mL的S-告依春对照品溶液；按比例混合R-告依春对照品溶液和S-告依春对照品溶液，配制成不同含量的系列对照品溶液；

②采用高效液相-紫外-圆二色谱法按步骤b)所述测试条件对步骤①配制的系列对照品溶液分别进行测定，并以R-告依春的质量百分含量为横坐标X，以圆二色谱峰面积ΔA与紫外色谱峰面积A的比值(g＝ΔA/A)为纵坐标Y，进行回归处理并绘制标准曲线。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述板蓝根制品包括板蓝根饮片和板蓝根制剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a)中所述的回流提取的时间为30～90分钟。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a)中所述的超声提取的时间为10～30分钟。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a)中对收集的甲醇洗脱液进行氮吹干燥的温度为30～60℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b)中所述的流动相是由100％乙腈与质量浓度为0.02％的磷酸水溶液按体积比为10：90组成。