[发明专利]多肽及其应用

说明书

本发明是申请号为201310585699.8，申请日为2013年11月19日，发明名称为《多肽及其应用》的分案申请。

技术领域

本发明特别涉及一种肺癌干细胞特异性结合多肽及其应用，属于生物医药领域。

背景技术

2008年世界卫生组织在其公布的报告中明确指出，非传染性疾病正成为人类最为致命的“杀手”，每年有大约500 万人死于癌症。但整体来讲，对于肿瘤的治疗效果并不理想。主要在于肿瘤发病机理尚不清楚，例如肿瘤的起源问题。肿瘤干细胞(Cancer Stem Cells, CSCs)理论的提出让我们看到新的希望。肿瘤干细胞理论认为肿瘤组织具有异质性，所有的肿瘤细胞中，只有很小一部分细胞具有形成并维持肿瘤生长和异质性的能力，这一小部分细胞被称作肿瘤干细胞。并且人们认为肿瘤干细胞是肿瘤起始和生长，复发和转移，以及耐药性产生的根源。对于肿瘤干细胞的研究有利于我们更好的了解肿瘤发生发展的过程和建立一种更有效的治疗策略。

目前，肿瘤干细胞的研究主要依赖于分子标志物，然而多数实体瘤并没有找到特异的肿瘤干细胞分子标志物。研究人员一直期望建立一种新的策略，建立一种不依赖于特异分子标志物的鉴定和分离肿瘤干细胞方法。近些年出现的表面展示技术可以在未知细胞表面分子的情况下实现细胞特异性结合多肽的筛选。表面展示技术是利用基因工程手段实现外源多肽（或蛋白质结构域）以融合蛋白形式在微生物表面进行展示的新型基因工程技术，被展示的多肽或蛋白质结构域可以保持相对独立的空间结构和生物活性。细菌表面展示技术结合流式细胞分选技术以快速、高通量的特点为展示技术领域中应用的热点。但是，如何利用上述表面展示技术进行肺癌干细胞特异性结合多肽筛选及进一步建立一种不依赖于特异分子标志物的鉴定和分离肿瘤干细胞的方法仍是业界亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种多肽，它包含SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示的氨基酸序列。

本发明的目的之二在于提供前述多肽的衍生物，它包括：

(i) SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示的氨基酸序列中的一个以上氨基酸残基被取代形成的多肽，

或者，(ii)在SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示的氨基酸序列中的一个以上氨基酸残基内引入取代基团而形成的多肽，

或者，(iii) 权利要求1所述多肽与选定化合物融合形成的多肽，

或者，(iv)将选定的附加氨基酸序列融合于SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示的氨基酸序列而形成的多肽。

进一步的，所述多肽的衍生物包括：

SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示氨基酸序列中的一个以上，优选1～3个，更优选1～2个，尤其优选1个保守性氨基酸残基被取代形成的、能与非小细胞肺癌H460细胞系中的肺癌干细胞特异性结合的多肽。

进一步的，所述多肽的衍生物包含SEQ ID No.1～SEQ ID No.3中任一项所示的核心氨基酸序列，而在核心氨基酸序列两端分别连接具有X1、X2个氨基酸的肽段，其中X1、X2为0～7中的任一个整数。

作为其中较为典型的案例之一，所述多肽的衍生物具有SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。

本发明的目的之三在于提供又一种多肽，它具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，并且其中的两个半胱氨酸之间形成二硫键，构成环形多肽结构。

本发明的目的之四在于提供前述多肽或其衍生物在制备非小细胞肺癌H460细胞系肺癌干细胞检测和/或分离试剂或试剂盒中的应用。

本发明的目的之五在于提供前述多肽或其衍生物在制备非小细胞肺癌H460的治疗药物中的应用。

本发明的目的之六在于提供一种分离的多核苷酸或其变异体，它能够编码前述的多肽或其衍生物。

本发明的目的之七在于提供包含编码前述多肽或其衍生物的多核苷酸或其变异体的表达载体。

本发明的目的之八在于提供包含前述多核苷酸或其变异体或前述载体的宿主细胞。

本发明的目的之九在于提供一种荧光素标记的多肽，它包含：

前述多肽或其衍生物，

以及，用以标记所述多肽或其衍生物的荧光素分子。

本发明的目的之十在于提供一种多肽标记的磁性粒子，它包含前述多肽或其衍生物以及磁性粒子，其中，所述磁性粒子包括磁性纳米粒子或超顺磁纳米粒子。