[发明专利]包含NY‑ESO‑1的微泡、其制备方法及用途

权利要求书

1.包含NY-ESO-1肽段、全长蛋白和/或其编码核酸的微泡在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述编码核酸是DNA和/或RNA。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述微泡包括外泌体。

4.一种微泡，其特征在于，所述微泡内包含NY-ESO-1肽段、全长蛋白和/或其编码核酸，所述微泡具有预防和/或治疗肿瘤的作用。

5.一种制备如权利要求4中所述微泡的方法，其特征在于，所述方法包括：培养表达NY-ESO-1肽段或全长蛋白的细胞株，从培养液上清中分离所述微泡。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述从培养液上清中分离所述微泡，包括如下步骤：

（1）通过离心去除上清液中的细胞、死细胞和细胞碎片，然后通过超速离心获得分泌到培养液中的微泡；

（2）任选地，还包括通过蔗糖密度梯度离心或超滤进一步纯化所述微泡，获得密度大小不同的微泡。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）具体包括：

将收取的上清液，以300g的速度离心10分钟去除细胞；以2000g的速度离心30分钟去除死细胞；以10000g的速度离心1小时去除细胞碎片；以100000g的速度超速离心2小时，收集沉淀获得分泌到培养液中的微泡。

8.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于，所述细胞株是内源性包含NY-ESO-1编码核酸的细胞株，或外源转染NY-ESO-1编码核酸的细胞株；

优选地，所述内源性包含NY-ESO-1编码核酸的细胞株是人恶性黑色素瘤细胞A375细胞株，所述外源转染NY-ESO-1编码核酸的细胞株是HeLa或293T细胞株。

9.一种肿瘤免疫疗法，其特征在于，所述肿瘤免疫疗法包括给肿瘤患者施用包含NY-ESO-1肽段、全长蛋白和/或其编码核酸的微泡。

10.根据权利要求9所述的肿瘤免疫疗法，其特征在于，所述微泡包括外泌体。