[发明专利]一种鉴别龙头凤尾型优质铁皮石斛的试剂盒及其应用有效
申请号: | 201710971255.6 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN107916297B | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 廖俊杰;莫建梅;关仕侠;王志学;李庆国;李进进 | 申请(专利权)人: | 广东轻工职业技术学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞;裘晖 |
地址: | 510300 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 龙头 凤尾 优质 铁皮 石斛 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒,其特征在于:包含三对引物对,分别如下:
引物对SC1:
SC-1L:5’-TGGCTACCACGTGATAGATGT-3’;
SC-1R:5’-GTTTCTTAGGAGGAATTGCTCAG -3’;
引物对SC2:
SC-2L:5’-TCCAGCGGAAAGGGAGATAC -3’;
SC-2R:5’-ACTTTCCCTCCCAAGCTGAG -3’;
引物对SC3:
SC-3L:5’-CTCGCCATATCGTCGAGCA -3’;
SC-3R:5’-ACGTTCTGTTATGGGGTCCT -3’;
所述试剂盒还包括PCR用酶、PCR用水和PCR用缓冲液中的一种以上。
2.根据权利要求1所述的鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒,其特征在于:
所述的PCR用酶为Taq酶或Ex Taq酶;
所述的PCR用水为去离子水或超纯水。
3.权利要求1或2所述的鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒在鉴定和/或生产优质铁皮石斛中的应用。
4.根据权利要求3所述的鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒在鉴定和/或生产优质铁皮石斛中的应用,其特征在于包括如下步骤:
(1)提取待检测石斛的基因组;
(2)使用如下三对引物对步骤(1)获得的基因组进行PCR,当获得目的条带时,表明待检测的石斛是“龙头凤尾”型优质铁皮石斛;当没有获得目的条带时,表明待检测的石斛不是“龙头凤尾”型优质铁皮石斛;
所述三对引物对的序列如下:
引物对SC1:
SC-1L:5’-TGGCTACCACGTGATAGATGT-3’;
SC-1R:5’-GTTTCTTAGGAGGAATTGCTCAG -3’;
引物对SC2:
SC-2L:5’-TCCAGCGGAAAGGGAGATAC -3’;
SC-2R:5’-ACTTTCCCTCCCAAGCTGAG -3’;
引物对SC3:
SC-3L:5’-CTCGCCATATCGTCGAGCA -3’;
SC-3R:5’-ACGTTCTGTTATGGGGTCCT -3’;
SC-1L和SC-1R扩增的目的条带长度为523bp;
SC-2L和SC-2R扩增的目的条带长度为1017bp;
SC-3L和SC-3R扩增的目的条带长度为1196bp。
5.根据权利要求3或4所述的鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒在鉴定和/或生产优质铁皮石斛中的应用,其特征在于:所述的优质铁皮石斛为茎长≦15厘米、直径≧7毫米、多糖含量≧45%的铁皮石斛。
6.根据权利要求4所述的鉴别“龙头凤尾”型优质铁皮石斛的试剂盒在鉴定和/或生产优质铁皮石斛中的应用,其特征在于:步骤(2)中所述的PCR的条件为:94℃预变性4分钟;94℃变性50秒、58℃退火45s、72℃延伸1min,30个循环;最后72℃延伸8min。
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