[发明专利]一种小型昆虫血淋巴收集方法

说明书

本发明属于昆虫生理生化领域，具体涉及一种小型昆虫血淋巴收集方法，所要解决的技术问题是提供一种小型昆虫血淋巴收集方法，能最大程度的保证收集的小型昆虫的血量，有利于下一步研究，采用的技术方案为：一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。

技术领域

本发明属于昆虫生理生化领域，具体涉及一种小型昆虫血淋巴收集方法。

背景技术

昆虫血淋巴是血液和淋巴液的混合物，在昆虫的开放式循环系统中循环，是昆虫代谢的重要场所，也是代谢过程中各种物质储存和交换的场所，在昆虫的防御、抗冻、免疫、损伤应用等方面起重要作用。

小型昆虫尤其是果蝇（Drosophila）血液代谢途径、血细胞生成机制与哺乳动物高度保守，相对于哺乳动物模型而言，果蝇有着较少的冗余基因。研究发现胰岛素和营养物阻止果蝇血干细胞分化，饮食变化导致的炎症反应和对血液发育产生影响。II型糖尿病和肥胖症与慢性炎症紧密地关联在一起，而慢性炎症是由血细胞的异常激活所引发的。研究表明，位于细胞膜上并能将外部信号传递转化成细胞机能的PVR基因在果蝇属的血液形成系统中起着关键的作用，果蝇和脊椎动物中的血细胞生成机制的相似性为白血病的研究提供了有利的条件。目前科学家正在探索以果蝇血液作为血液研究的新模型。

目前，血淋巴已成为昆虫研究中最常用的研究材料之一，但是由于昆虫大多个体较小，血淋巴含量少，离体后容易发生凝血和黑化反应，给收集工作带来一定的难度。

血淋巴的收集方法有很多种，如蜡盘法、离心法、背血管取血法、灌注法、压榨或匀浆法、发射流血法、撕裂法、切割法、剪开法、穿刺法等，但是这些方法各有利弊，且主要针对收集大中型昆虫，对于小型昆虫血淋巴的收集，经常会损伤小型昆虫体壁或内部结构（如肠道），造成收集的血淋巴不纯或被污染，且血淋巴量较少，给后续研究造成困难和不便。

发明内容

本发明解决的技术问题在于提供一种小型昆虫血淋巴收集方法，能最大程度的保证收集的小型昆虫的血量和纯度，有利于下一步研究。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。

具体包括以下步骤：

（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加生理液，以保证血液的生理活性；

（2）将小型昆虫麻醉；

（3）将麻醉的小型昆虫背部朝后横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定小型昆虫胸部，在右侧轻压固定小型昆虫腹部，左右昆虫针与离心管内壁和小型昆虫身体纵轴分别成45°角；

（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使小型昆虫身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；

（5）右侧昆虫针平放于小型昆虫腹部侧面，与小型昆虫身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使小型昆虫胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，溢出结束后，用左右昆虫针移除小型昆虫，得到小型昆虫血淋巴。

本发明所述生理液为0.65%生理盐水。

本发明所述血淋巴包括淋巴液、血清及血细胞。

如上所述，本发明与现有技术相比具有的有益效果是：

1、本发明先将小型昆虫麻醉，避免了昆虫受外界刺激，体内生理环境改变，血细胞变异，影响血淋巴的研究；

2、本发明最大程度的保证取血量：小型昆虫的血量特别少，取血极其困难，不能满足血液研究模型血量的需要，本发明独创的方法可以最大程度的保证取血量；