[发明专利]一种白芷组培体系的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种白芷组培体系的建立方法。

背景技术

白芷又名：兴安白芷、走马芷、芬香、泽芬、香白芷。属多年生高大草本，高1~2米。根圆柱形或圆锥形，有分枝，表面黄褐色。茎中空，有纵长沟纹，基部粗大，无毛，通常紫色。叶互生，呈羽状分裂，先端尖急，边缘有不规则的锯齿。7~8月开花，花白色，排成复伞形花序生于枝顶或侧生。8~9月结果，果实长圆形或卵圆形，近海绵质，侧棱翅状。根可入药，夏、秋间采挖，晒干备用。生长于山西、河南、河北、湖南、湖北、以及东北、华北有产。多生于林下、河岸、溪旁，山谷草地等处。白芷味辛，性温。具有散风除湿，通窍止痛，消肿排脓。我国科学家对于白芷的进一步研究己取得一定的成绩,但是仍然存在着优良品种引进与驯化的相关问题,对于适宜我国大部分地区环境生长的品种开发以及白芷的大量快速繁殖的报道仍然较少。白芷繁殖较为困难,其主要繁殖方式包括种子繁殖、扦插繁殖以及压条繁殖等。利用种子繁殖时,其种子存在发芽难和发芽率低的问题,大大减少了成活率及成苗率，成本较高,收益少；利用扦插和压条的方式进行繁殖时,其扦插的枝条不易生根或者较为缓慢,不容易成活,也造成了白芷成苗率的问题。因此，急需建立系统的白芷组织培养植株再生体系，以提高其繁殖速度和规模,从而实现白芷种苗的工厂化生产是当前急待解决的一大课题。

发明内容

本发明的目的在于提供出一种以带芽茎段为外植体，经过诱导、增殖、生根以及炼苗移栽等步骤成功地获得白芷组织培养再生植株,建立系统的白芷组织培养植株再生体系，从而实现了本发明的目的。用低成本取得高效益的，是技术方法简单，设备少，成苗快，生长速度快，根正苗壮，产量高，效益好的一种白芷组培体系。

本发明的一种白芷组培体系的建立方法，其特征在于包括以下的步骤：

（1）外植体消毒：采集回来的白芷茎段以淸水冲洗9min后并用毛刷轻轻刷去上面的杂质,在超净工作台中用70%%乙醇溶液中消毒29s，后用无菌水洗2次，再用4%安替富民溶液漂洗4min，用无菌水冲洗3次后用无菌滤纸吸去水分后备用;

（2）诱导培养：将步骤（1）消毒好的白芷茎段按成对芽为一个单位切成约1.4cm长的茎段，剪去茎段底部处理过程中褐化部分，接种到诱导培养基中进行芽诱导培养,接种后先在24℃条件下全暗培养2天，然后置于每天光照9小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为24℃的条件下培养直至形成不定芽;

（3）增殖培养：将步骤（2）培养得到的芽苗，从基部切取芽并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在24℃条件下全暗培养1天，然后置于每天光照10小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为24℃的条件下培养，29天继代一次;

（4）生根培养：将步骤（2）或（3）的芽苗长至1.4cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在24℃条件下全暗培养1天，然后置于每天光照13小时，光照强度为2900lx，培养温度为24℃的条件下培养至生根;

（5）炼苗移栽：将长至2cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗4天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:蛭石＝1：2混合成的基质中于每天光照9小时，光照强度为2900lx，培养温度为24℃，空气湿度为80%的培养箱中培养4天，然后移栽定植于大田中。

步骤（2）所述的诱导培养基为：MS+0.1mg/L 6-BA+14g/L蔗糖+3.4g/L琼脂，pH为5.3。

步骤（3）所述的增殖培养基为：MS+0.25mg/L NAA+0.15mg/L 6-BA+14g/L蔗糖+3.4g/L琼脂，pH为5.3。

步骤（4）所述的生根培养基为：MS+0.45mg/L IBA+14g/L蔗糖+3.4g/L琼脂，pH为5.3。

本发明的优点是：白芷市场销量大，收益快，是一种很好的经济型植物。目前白芷主要以种子繁殖、扦插、压条等方式进行种苗繁育，存在繁殖系数低、成苗率低、成本高、收益少等缺点，制约了白芷产业的发展。利用植物组织培养技术提高其繁殖速度和规模,从而实现白芷种苗的工厂化生产。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导、增殖、生根以及炼苗移栽等步骤成功地获得了白芷组织培养再生植株,建立了系统的白芷组织培养植株再生体系。繁殖系数大，成苗率高，成本低，收益好。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1