[发明专利]一种肿瘤靶向性多肽

说明书

本发明公开了一种肿瘤靶向性多肽(p46‑3)，肽46(人细胞肿瘤抗原p53的361～382片段)的羧基端通过连接肽与肿瘤靶向性多肽片段精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸连接。本发明通过大肠杆菌诱导表达，经过金属鳌合亲和层析和凝胶层析制备得到p46‑3。体外实验表明p46‑3具有比肽46更显著的抗肿瘤细胞生长的作用。

技术领域

本发明涉及生物工程制药技术领域，具体涉及一种肿瘤靶向性多肽。

背景技术

研究表明，p53基因具有阻滞细胞周期、维持基因组稳定、促进细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成等作用(李文娟，潘庆杰，李美玉.p53基因及其功能研究进展.生物技术通讯，2014,25(2):282-285.)。肽46，人细胞肿瘤抗原p53的361～382片段，氨基酸序列GSRAHSSHLK SKKGQSTSRHKK(SEQ ID No：3),是一种富含赖氨酸的22肽，相应于p53的单股DNA末端结合位点。在体外它能活化野生型p53的特异性DNA结合作用，并诱导表达p53的肿瘤细胞凋亡(G.Selivanova et al.Nature Med.1997,3,632)。

整合素α_vβ₃在肿瘤细胞的黏附、转移和肿瘤血管新生中发挥了重要作用(Pasqualini R,Arap W,McDonald DM.Probing the structural and moleculardiversit y of tumor vasculature[J].Trends Mol Med,2002,8(12):563-571)。在一些肿瘤细胞或者肿瘤新生血管内皮细胞整合素α_vβ₃受体常特异性地高表达,而在正常组织血管中不表达或表达量很少(Zetter BR.On target with tumor blood vessel markers[J].Nat Biot echnol,1997,15(12):1243-1244)，RGD肽与肿瘤血管内皮细胞上的整合素结合,阻止或延缓肿瘤迁移和肿瘤血管生成。整合素α_vβ₃受体由于可与RGD肽结合、介导多种病理生理过程而成为整合素家族中占重要地位。RGD肽是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)的小分子多肽，广泛存在于生物体内各种组织的细胞外基质以及血液的多种成分中,人体中最常见的含RGD序列的蛋白，包括纤维蛋白、层粘连蛋白、纤连蛋白、胶原等(Temming K,Schiffelers RM,Molema G,et al.Kok RJ.RGD-based strategies forselective delivery of therapeutics and imaging agents to the tumourvasculature[J].Drug Resist Updat,2005,8(6):381-402.)。含RGD序列蛋白与受体整合素结合，参与细胞与细胞、细胞与基质间的相互作用，激活多条信号传导通路,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。含RGD序列的多肽可与肿瘤细胞表面的α_vβ₃特异性结合,在肿瘤细胞的黏附、转移和肿瘤新生血管生成中发挥重要作用。

发明内容

本发明利用的Arg-Gly-Asp序列具有肿瘤靶向的优势，将肽46(p46)和RGD肽在C端进行连接，构建一个具有与αν类整合素的特异结合的特性的新型抗肿瘤药物，具有肿瘤细胞靶向性。

本发明具体技术方案如下：

一种肿瘤靶向性多肽，肽46的羧基端通过连接肽与含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列的多肽(RGD肽)连接。现有技术下，含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序的线性多肽、环状多肽都在本发明所述的RGD肽的范畴。本发明的一个优选的方案，RGD肽的序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明所述的连接肽为1～50个富含Gly和/或Ala和/或Ser氨基酸残基的柔性肽。优选的，所述连接肽氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。