[发明专利]橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用

说明书

本发明公开了一种橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用。该2个蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示。本发明还公开了一种编码上述蛋白的基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示。本发明还公开了一种上述基因在提高橡胶树胶乳产量中的应用。本发明采用割胶、乙烯利和茉莉酸刺激可显著提高HbACBP1和HbACBP2在橡胶树胶乳中的表达水平，并与胶乳产量呈显著正相关，在橡胶树品种改良和基因工程领域具有较大的经济价值和应用前景。

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体地说，涉及一种橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用。

背景技术

脂类物质在植物体生长发育和适应外界环境中发挥重要作用，其代谢过程需要酰基载体蛋白的参与，其中一类酰基载体蛋白是酰基辅酶A(CoA)结合蛋白(Acyl-CoA-Binding Protein，简称ACBP)。ACBP 家族蛋白普遍存在于原核和真核生物细胞中，其共同特征是含有1个高度保守的酰基CoA结合结构域(Acyl-CoA-binding domain，简称 ACBD)，部分成员除含有ACBD外还具有介导蛋白质互作的ankyrin repeats和kelch motif等重复序列。根据这些结构特点，可将ACBP家族蛋白分为四大类，它们具有不同的结构域组成、亚细胞定位及生物学功能等。

植物ACBP蛋白主要通过调节脂肪酸、酰基CoA库、脂肪酸β氧化和囊泡运输等细胞内多种复杂的代谢活动，参与植物生长发育、胁迫响应和膜修复等生理过程。目前，已从木薯、蓖麻、油菜、水稻、拟南芥、杨树和苹果等植物中分离鉴定了ACBP，而世界上最重要的产胶植物巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中的ACBP基因迄今为止还没有得到鉴定和研究。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示。

本发明还公开了一种编码上述的橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白基因HbACBP1和HbACBP2。

进一步地，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示。

本发明还公开了一种含有上述的基因的重组表达载体。

本发明还公开了一种含有上述的基因的转基因重组菌。

本发明还公开了一种编码橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白基因HbACBP1和HbACBP2的克隆方法，所述HbACBP1基因采用的引物如下：HbACBP1正向引物：TTCTCGACCAACTTCTAAGT，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；反向引物：GTTTTATTTCAATAAATAATTGACTAGG，其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述HbACBP2基因采用的引物如下：HbACBP2正向引物：CCCCCGAGGCGCAAATCAATC，其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；反向引物：GGGAACTTCGGCCTCAATTCG，其核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

本发明还公开了一种上述基因在提高橡胶树胶乳产量中的应用。

与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：

1)本发明首次在橡胶树产胶细胞中发现了HbACBP1和HbACBP1 基因。HbACBP1基因的cDNA全长为707bp，CDS序列279bp，编码92个氨基酸的蛋白。HbACBP2基因的cDNA全长为1215bp，CDS 序列855bp，编码285个氨基酸的蛋白。