[发明专利]一种生防内生真菌及其应用

说明书

本发明提供一株防治三七根腐病的三七内生真菌及其应用，属于农作物病害防治技术领域，所述的生防菌株为青霉菌(Penicillium sp.)。该菌株通过产生活性物质抑制三七病原菌的生长，对三七根腐病表现出较好的防治效果。应用时在三七苗期或者是成株期灌根使用。该菌剂也可与有机肥混合制成菌肥使用。本发明所述生防菌株青霉菌编号为Z1‑1031是从三七根部中获得，其保藏编号为CGMCC No.14134。此菌与土壤生态和三七植物和谐相融，无毒，无致病性，因此在三七根腐病生物防治中具有十分广阔的应用前景。

技术领域：

本发明涉及一株生防内生真菌青霉(Penicillium sp.)及其应用，具体涉及一株对三七生长具有益生作用的内生真菌及其在防治三七根腐病中的应用，属于农作物病害防治技术领域。

背景技术：

三七属多年生阴生植物，生长过程中病害发生频繁，其中三七根腐病是影响三七产量的最主要因素。目前对根腐病的防治尚没有成熟有效的方法，前人对该病的发生与防治作过一些研究。土传病原菌导致三七根部发生腐烂的主要原因之一，真菌病原菌主要包括：柱孢菌、尖孢镰刀菌、茄腐镰孢菌、立枯丝核菌、轮枝孢霉菌、茎点霉菌，细菌病原菌以假单胞菌为主。七农为了保证三七的产量，施用大量化肥，导致土壤理化性质改变，土壤中菌群比例失衡，三七重金属严重超标等一系列不良问题。内生菌是一类具有重要经济价值的微生物资源，种类丰富，分布广泛，基本上每一种植物内都含有与之相适应的内生菌。内生菌中含有多种代谢途径，其对植物修复，元素循环，生物降解和生物转化起重要作用，同时在严重恶劣的环境条件,植物也可以为微生物提供庇护，协助微生物减少周围环境带来的压力。三七内生真菌在平衡生态环境促进三七生长过程中起重要作用。目前，我们已从三七的根、茎、叶和种子中分离出来89株内生真菌，它们分布在2个门(子囊菌门，接合菌门)，12个目，23个属，63.4％菌株具有拮抗至少一株三七致病菌的活性。本领域技术人员正在努力研究更多的内生真菌，以拮抗三七的根腐病害。

发明内容：

本发明的目的在于：针对目前三七根腐病严重发生，且面积逐年扩大，农药、轮作、土壤的化学处理等防治措施效果不理想，同时带来环境污染的问题，提供一种高效防治三七根腐病的生防菌及其应用。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

本发明提供了一种防治三七根腐病的生防内生真菌Z1-1031，经过形态学和分子生物学研究鉴定为青霉(Penicillium sp.)。

所述的生防内生真菌青霉菌的制备过程如下：将所述的菌株接种于PDA培养基平皿中，28℃倒置培养7-10天，活化菌株。使用蒸馏水将活化好的菌株制备成孢子悬浮液，显微镜下计数孢子浓度约为10⁸cfu/ml。取2ml孢子悬浮液接种于发酵培养基PDB中。26-28℃，120-150r/min，培养7-10天。

所述的生防内生真菌在防治三七根腐病中的应用方法如下：

可在三七成株期灌根使用，显微镜下计数，稀释孢子液到10⁶cfu/ml浓度，每株使用50ml。连续使用2-3次，每次间隔10-15天。该菌剂也可与有机肥混合配制成菌肥使用。

本发明有益效果：

本发明筛选出的生防内生真菌青霉菌发酵液能够明显抑制三七致病真菌腐皮镰孢、柱孢、链格孢等的生长，并且促进三七植株生长。由于是生物制剂，因此没有化学农药使用带来的一系列问题，对减少农业污染且有效防治三七根腐病大有益处。本发明生防内生真菌分离自健康三年生三七根部，同时也存在于三七的根际土壤中，其与三七土壤生态和谐相容，有利于充分发挥菌株的优势。

本发明生防内生真菌菌株培养条件简单，遗传稳定，易于工业化生产扩大，具有良好的开发应用前景。