[发明专利]一种以人MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法在审
申请号: | 201710947982.9 | 申请日: | 2017-10-12 |
公开(公告)号: | CN107557470A | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 戴永东;刘璐璐;赵鹏;关新元 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886 |
代理公司: | 杭州九洲专利事务所有限公司33101 | 代理人: | 王洪新,王之怀 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 muc13 作为 肝细胞 特异 标志 检测 方法 | ||
1.一种以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,包括以下步骤:
1)从被检人群获取人体组织样本,然后进行RNA提取及逆转录;
2)检测人体组织样本中的MUC13;
3)若被检组织样本中MUC13 ΔCT低于正常组织样本MUC13 ΔCT平均值的,则提示被检组织样本中具有癌肝细胞;
所述步骤2中的检测通过QPCR进行;所采用的MUC13荧光实时定量PCR引物为:
正向5’-CCTTCGGTGTGATTATTATGGC-3′
反向5′-GCATCTGGCTGTCTCTGGAG-3′。
2.根据权利要求1所述的以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,其特征在于:所述步骤2中的QPCR,采用的对照引物为:
正向5’-CTCTTAGCTGAGTGTCCCGC-3′
反向5′-CTGATCGTCTTCGAACCTCC-3′。
3.根据权利要求1或2所述的以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,其特征在于:所述步骤2中,正常组织样本的MUC13 ΔCT平均值为15.5。
4.根据权利要求3所述的以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,其特征在于:所述步骤1)中的RNA提取及逆转录,包括利用Trizol进行RNA提取及利用RNA逆转录试剂盒逆转成互补DNA。
5.根据权利要求4所述的以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,其特征在于:所述MUC13 PCR引物和对照引物合成时,采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化。
6.根据权利要求5所述的以MUC13作为肝细胞癌特异标志物的检测方法,其特征在于:所述MUC13 PCR引物和对照引物使用时,采用三蒸水稀释至工作液浓度10μM。
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