[发明专利]一种核酸蛋白‑电导联用检测系统及其检测方法在审
申请号: | 201710945093.9 | 申请日: | 2017-09-30 |
公开(公告)号: | CN107764913A | 公开(公告)日: | 2018-03-06 |
发明(设计)人: | 徐顺利 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N21/33;G01N27/06 |
代理公司: | 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙)32249 | 代理人: | 陈建和 |
地址: | 210093 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 蛋白 电导 联用 检测 系统 及其 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物化学和生物制药领域,具体涉及一种核酸蛋白-电导联用检测系统及其检测方法。
背景技术
在生物科学和生物制药研究生产过程中,核酸蛋白检测装置是层析分析系统中非常重要的检测设备。配上层析柱、恒流泵、部分收集器(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。已成为当今从事生命科学研究、药物测定、化工、环保、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外特定波长有明显吸收的特征,对样品成份含量比对分析,以进行样品蛋白、核酸等物质识别和含量测定。虽然目前国内生产的蛋白检测仪种类繁多,但均采用单波长检测(254nm,280nm…)。测量中这些检测仪只能选定某一波长(280nm或254nm)检测对应物质(蛋白或核酸),而在蛋白核酸等共存体系中,一次层析无法测出蛋白(或核酸)的纯度,两次层析即需双倍实验时间又不可能保证相同的实验条件。双波长检测不仅具有单波长测量的全部功能,而且一次可以检测物质对不同波长的吸收,提高层析系统的科学性和实验效率。
发明内容
本发明的目的是:提供一种核酸蛋白-电导联用检测系统及其检测方法,是在完成“双波长核酸蛋白检测装置”基础上,经过反复实验论证之后完成的又一项检测装置。特点是在測量280nm和260nm吸收的同時,测量洗脱液(流动相)的离子强度(用电导率对应洗脱液的离子强度),为大专院校教学科研实验和生物医药研发技术人员摸索核酸蛋白分离条件、制定洗脱工艺和后期进一步分离纯化提供了一种更为高效独特的设备。整体装置设计紧凑、系统稳定、操作简便、数据采集、软件分析一体集成。
本发明的技术方案是:一种核酸蛋白-电导联用检测系统,包括双波长核酸蛋白检测装置,并配有层析柱、恒流泵、部分收集器以及带有嵌入式采集控制器的电脑工作站即构成一套完整的液相色谱分离系统;
所述双波长核酸蛋白检测装置内配有电导检测装置形成双波长核酸蛋白-电导联用检测装置,所述电导检测装置包括准直器、狭缝、样品池以及顺序连接的光电管、模拟信号器、对数转换器和双通道A/D转换器,所述样品池里配有电导电极,所述电导电极顺序连接电导检测放大器、相敏检波器和双通道A/D转换器;
所述嵌入式采集控制器通过接口控制器连接电脑工作站,并控制双波长切换和双通道A/D转换器的协调转换;
所述电脑工作站进行数据传输接收、屏幕绘谱、参数分析、谱图编辑、数据保存工作。
进一步的,所述电导电极为二电极,并采用高频双脉冲或方波为交变激励源。使用相敏检波技术,有效提高系统稳定性。
进一步的,所述接口控制器配有COM口和USB接口。
进一步的,所述双波长为260nm和280nm。
本发明还提供一种根据所述的核酸蛋白-电导联用检测系统实现的核酸蛋白-电导联用检测方法,具体步骤如下:
步骤一、利用液相色谱分离系统采集两束紫外光源单色光吸收数据;
步骤二、将两束紫外光源单色光投射入到准直器上,经狭缝射到样品池后分别透射到光电管上,经光电转换得到两路与透射光强度成正比例的电信号;
步骤三、在嵌入式采集控制器控制下,先将两路模拟信号放大,然后进行信号对数转换,此时得到的信号与样品池光吸收成正比例,再将此时得到的信号经双通道A/D转换形成数字信号;
步骤四、样品池里配有电导电极,将激励转换电路得到与电导值相关的交变信号,经信号放大和相敏检波得到与样品池内离子强度成正比的电信号;
步骤五、用KCL溶液校准后可得到样品池内的离子强度。
进一步的,所述两束紫外光源波长为260nm和280nm。
进一步的,采集的两束紫外光源单色光吸收数据和样品池电导率数据直接在电脑工作站的屏上显示图谱。
本发明的有益效果是:
1)“核酸蛋白电导联用检测装置”是“双波长核酸蛋白检测装置”完成基础上,经过反复实验论证之后完成的又一项多功能层析检测装置。特点是在測量280nm和260nm吸收的同時,測量洗脫液(流动相)的离子强度(用电导率对应洗脫液的离子强度)。为大专院校教学科研实验和生物医药研发技术人员摸索核酸蛋白分离條件、制定洗脱工艺和后期进一步分离纯化提供了一种更为高效独特的设备。整装置设计紧凑、系统稳定、操作简便、数据采集、软件分析一体集成。
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