[发明专利]一种土壤改良剂的制备方法

权利要求书

1.一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于：主要由以下步骤制备：

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至200~250目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:(10~20)混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为30~35Kv/cm，脉冲数15~20，处理时间为5~10min/h，50~60℃水浴加热进行酶解12~24h，得到酶解液1；

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离10~15min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖1.4~2.0%、玉米提取物1.6~2.0%、磷酸二氢钾0.2~0.5%、氯化钠0.5~1%，调节pH为7~8，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的60~70%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数180~200r/min，无菌空气通气量1~1.5L/min，发酵温度37~40℃，发酵7~10天，得到发酵液；

所述复合菌为地衣芽孢杆菌和乳酸菌；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至6.5~7.5，在5000rpm下离心分离10~15min，取上清液2备用；取沉淀，按其质量8~10%加入SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶中一种或者一种以上组合，于50~60℃、130rpm水浴摇床中酶解5~6h，得到酶解液2；

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量分数比加入壳聚糖溶液40~50份、腐殖酸10~15份、聚丙烯酰胺10~15份、沥青乳10~15份，无水乙醇20~25份，氯化钙粉末1~5份，硫酸镁粉末1~5份，混合均匀，然后于50~60℃鼓风干燥机中干燥4~6h，过100目筛制得药粒；

（2）在70~75℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为2:1:1~4:3:2进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为10~15mmol/L；

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入5~6%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

2.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述中性蛋白酶活力为20~30万u/g，酶用量为7~10%。

3.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述复合菌接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵3~4天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至7~10天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为7~10%，乳酸菌接种量为5~8%，蔗糖添加量为5~10%。

4.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述SM98011蛋白酶、SM97010蛋白酶制备方法如下：

将SM98011菌种和SM97010菌种分别接种于500ml三角瓶的液体发酵培养基中，在28℃，200rpm培养30h后，将发酵液于4℃，10000g下离心15min，取上清液，即为粗酶液；

所述培养基含有以下重量分数比组分：玉米粉1~3份，麸皮0.5~2份，豆粕1~3份，贝壳粉1~3份，磷酸氢二钠0.4~0.6份，磷酸二氢钾0.03~0.05份，碳酸钠0.1~0.3份，调节pH为7.5。

5.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述改性壳聚糖制备方法如下：

（1）称取50份壳聚糖，加入到600ml 95%乙醇溶液中侵泡，恒温60℃溶胀2h得到壳聚糖侵泡液；

（2）将150份香草醛溶解于400ml 95%的乙醇中，倒入壳聚糖侵泡液，得到混合液；

（3）将混合液放置于微波快速反应装置中，设定加热温度70℃，反应10min，微波功率300w，搅拌；

（4）反应完成，冷却后过滤，乙醇洗，水洗，真空干燥至恒重，即可得改性壳聚糖；

所述壳聚糖分子量为5~6万。

6.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为0~20L/min。

7.根据权利要求1所述的一种土壤概改良剂的制备方法，其特征在于，所述SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶添加量比值为1:2:1。