[发明专利]一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法有效
| 申请号： | 201710935163.2 | 申请日： | 2017-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN107603957B | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 叶建强;李拓凡;孙舒;邵红霞;秦爱建;谢菁;吕璐 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N5/071 |
| 代理公司： | 南京钟山专利代理有限公司 32252 | 代理人： | 戴朝荣 |
| 地址： | 225000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 扩增 亚群禽 白血病病毒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1) 鸡肝细胞的培养；
2) 鸡肝细胞高效扩增J亚群禽白血病病毒：将鸡肝细胞接种培养，在汇合度为70%时，将J亚群禽白血病病毒接种细胞，以含2%胎牛血清的培养基培养；
J亚群禽白血病病毒的测定；
步骤1)中，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以0.25%的胰酶进行消化、传代至所需的细胞培养板中；步骤2)中，将鸡肝细胞接种培养，在汇合度为70%时，将J亚群禽白血病病毒接种细胞，MOI为0.001，做两个重复，以含2%胎牛血清的培养基培养7天，每天收集200μl上清冻于-80℃冰箱备用，同时每孔补200μl含2%胎牛血清的培养基；
测定收集上清的TCID50；利用GraphPad Prism 5软件绘制J亚群禽白血病病毒生长曲线；
鸡肝细胞能高效扩增J亚群禽白血病病毒，病毒效价可高达1.58×107TCID50/ml。
2.根据权利要求1所述的高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，其特征在于：步骤1)中，鸡肝细胞采用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行培养。
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