[发明专利]一种蓝莓花青素的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于天然生物材料的制备方法，特别涉及一种蓝莓花青素的提取方法。

背景技术

蓝莓果实中含有丰富的营养成分，具有防止脑神经老化、保护视力、强心、抗癌、软化血管、增强人机体免疫等功能，营养成分高。蓝莓中含有的花青素，是其他水果如苹果、葡萄的几倍甚至几十倍，总氨基酸含量0.254%，比山楂还高。蓝莓花青素抗氧化性很强，对眼科和心脑血管疾病有较好的疗效，能起到美容保健等多种功效。但是现有技术中对蓝莓花青素的提取率还是很低。

如专利申请号CN201210487338.5，一种稳定性好的蓝莓花青素的提取方法，先将原料粉碎成20-60目的细粉；再用60%的乙醇水提取三次，提取温度为50℃，提取时间分别为2h、2h、1h；然后将真空浓缩回收乙醇后将浓缩物加纯水沉淀去杂后将上清液经膜分离后再次真空浓缩；再超临界CO₂萃取分离，且萃取温度为35℃,压力为25MPa；最后精制去杂后真空干燥，并将干膏粉碎过筛并加入辅料混合均匀后检验、包装、入库；所述蓝莓花青素的提取方法利用膜分离技术和超临界萃取分离技术等低温分离技术可提取得到优质的蓝莓提取物粉末，不易变色，且稳定性好。专利申请号CN201510847783.1，蓝莓花青素的提取方法，提取方法如下：一、在闪式提取器中，将蓝莓和提取液破碎提取，过滤得提取液；二、将提取液与油相混合萃取，分离得油相和水相；三、将油相与柠檬酸萃取液混合反萃，得萃取水相；四、将水相和萃取水相混合后，利用膜分离法分离得花青素滤液，再将花青素滤液浓缩、干燥获得花青素。利用闪式提取器对蓝莓在短时间内高效地进行有效破碎，同时在高速搅拌下，增加提取液和破碎蓝莓料的接触和碰撞，减少提取时间。同时设置了步骤三的柠檬酸水溶液的反萃取步骤，利用花青素在柠檬酸溶液中更稳定的性质，将油相中的花青素反萃至柠檬酸水溶液。因此，花青素提取液中的杂质含量少，经膜分离得的花青素的纯度高。

又如专利申请号CN201010246735.4，一种蓝莓花青素的提取方法，提供一种蓝莓花青素的提取方法，具体包括如下步骤：(1)原料的预处理；(2)蓝莓花青素的提取，按料液体积比加入提取液浸提，得浸提液；离心收集、合并澄清的2次浸提离心的上清液；离心、减压浓缩得到蓝莓花青素粗提液；(3)蓝莓花青素的精制，蓝莓花青素粗提液经过大孔树脂的吸附、洗脱，洗脱液减压浓缩，将蓝莓花青素浓缩液冷冻干燥或喷雾干燥得到蓝莓花青素成品。本发明解决了蓝莓果采收季节性强不易储藏，滞销的蓝莓果因腐烂造成巨大的经济损失的问题；本发明工艺简单，操作可控，成本低，无污染，特别适于规模化提取蓝莓花青素的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种方法简单、成本低、便于工业化生产的、具有更高的蓝莓花青素提取率的方法。

本发明使用的米曲霉为A.orgzae SP-01。

具体的，本发明的技术方案如下：

一种蓝莓花青素的提取方法，包含以下步骤：

（1）取优质大米60~80份，清水洗净，加水侵泡至大米达到无硬芯，将侵泡好的大米放入电饭锅中煮至大米熟而不粘，然后将煮熟的大米分装至容器，接种米曲霉并混匀，置于35℃、90%以上湿度条件下发酵4~6天；所述米曲霉接种量为2~4%；

（2）取发酵4~6天后的大米放入容器中，加入其质量10~20%的磷酸缓冲液，均质3min后，4200r/min下离心5min，取上清液备用；所述磷酸缓冲液pH为6.5~7.5；

优选的，取发酵4天后的大米进行提取。

（3）清洗蓝莓鲜果，用液氮对蓝莓鲜果进行速冻处理，快速将蓝莓捣碎，然后加入其质量5~10%的步骤（2）所得上清液，混合均匀，10~30min后用冷冻干燥机在-80℃冷冻干燥，制得蓝莓干粉；所述蓝莓干粉中的水分应低于5%；所述液氮温度为-30~-50℃，流量为4~5m/s；

（4）取蓝莓干粉，按照1g：10~30ml的料液比将蓝莓干粉和醋酸溶液混合均匀，用柠檬酸调节pH至2~4，在40~60℃下，420w功率微波处理20s，提取60~130min，得到花青素粗提液；所述醋酸浓度为3~4mol/L；

（5）取花青素粗提液，加入其体积5~8%的柠檬酸，加入其体积5~8%的步骤（2）所得上清液，用乙酸乙酯萃取3次，非酯层加入到D101大孔树脂柱中，先用超纯水洗净脱，再用乙醇-水体系洗脱，收集50%的乙醇洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，得到精制花青素粉。所述柠檬酸pH为3~5，浓度为0.3~0.5g/ml。