[发明专利]二氢血根碱的分离制备及在制备抗炎药物中的应用

说明书

本发明属于医药技术领域，具体为二氢血根碱分离制备方法及在制备抗炎药物中的用途。苦地丁药材通过冷凝回流提取，浓缩，有机溶剂萃取，进而以柱色谱分离技术分离得到二氢血根碱(LC‑PDA分析纯度，MS、¹H‑NMR、¹³C‑NMR进行结构鉴定)。二氢血根碱能够显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞中炎性基因iNOS、TNF‑α、IL‑1β及IL‑6的转录，从而抑制炎性介质NO的释放，及炎症细胞因子TNF‑α、IL‑1β及IL‑6蛋白的表达水平。抗炎药效机制研究表明，二氢血根碱能够抑制LPS诱导RAW 264.7细胞中炎症信号信号通路中TLR4、TLR2的表达水平和NF‑κB通路中IκBα、p65的磷酸化，即二氢血根碱通过抑制TLRs/NF‑κB炎症信号通路的激活发挥抗炎作用。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及从中药苦地丁中分离制备出二氢血根碱，及其在制备抗炎药物中的应用。

背景技术

苦地丁又名小鸡菜，系罂粟科(Papaveraceae)紫堇属植物地丁草(Corydalisbungeana Turcz)的干燥带根全草，为2015版中国药典和《卫生部药品标准·蒙药》收录品种，其产地分布于辽宁、河北、山东、山西等地，其性味辛、苦、寒，可清热解毒、散结消肿，对感冒发热、咽喉疼痛等多种炎症有较好疗效。文献报道苦地丁主要含生物碱成分，二氢血根碱为苦地丁中分离出的主要生物碱成分之一(黄阁，李发美.苦地丁中生物碱的分离和结构鉴定.中草药，2003，34：882-883；郑建芳，秦民坚，郑昱，等.苦地丁生物碱的化学成分.中国药科大学学报，2007，38(2)：112-114；杜迎翔，翟小婷，朱粉霞，等.苦地丁药材超高效液相色谱指纹图谱研究.中药材，2015，38(8)：78-81；中国药品生物制品检定所编.中国民族药志.第2卷.北京：人民卫生出版社，1990：312-316；Xiaoting Zhai，Jiaquan Chen，CuihuaJiang，et al.Corydalis bungeana attenuates LPS-induced inflammatory responsesvia the suppression of NF-κB signaling pathway in vitro and in vivo.Journalof Ethnopharmacology.2016，194(24)：153-161)。

发明人前期利用柱色谱分离技术制备了二氢血根碱单体化合物(MS、¹H-NMR、¹³C-NMR分析鉴定)。二氢血根碱在苦地丁中含量较为丰富，易于分离制备，其分子式为C₂₀H₁₅NO₄，分子量为333.34，CAS登录号为3606-45-9。

目前关于二氢血根碱的专利报道中，二氢血根碱的应用仅有：二氢血根碱衍生物的盐(CN103585167A)；及涉及到以二氢血根碱为原料的，血根碱醇化物及其制备方法和在植物杀菌剂药物中的应用(CN102775417A)。目前尚无二氢血根碱在抗炎方面应用的报道。