[发明专利]一种促进丛枝菌根真菌孢子快速繁殖的方法

权利要求书

1.一种促进丛枝菌根真菌孢子快速繁殖的方法，其特征在于将丛枝菌根真菌的宿主在施加了丛枝菌根真菌的培养基质中培养，收获植物根系和培养基质，即得到丛枝菌根真菌扩繁菌剂；其中

所述的丛枝菌根真菌的宿主为玉米、万寿菊和三叶草；

所述的培养基质由沸石、蛭石、浮石和草炭按2～10：2～5:2～5:1体积比混合而成；并且培养基质中喷洒GR24或亚精胺溶液；

所述的培养时间为60-90天。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于培养容器为花盆，花盆的盆口直径为18～24cm，高为16～20cm，容积为3500cm³～7000cm³,花盆上方设有一圈高为10～15cm的玻璃纸。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于丛枝菌根真菌的接菌量为1000～2000个孢子/盆，优选为1500个孢子/盆。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的丛枝菌根真菌为摩西球囊霉和/或根内球囊霉。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于在步骤(3)中，所述添加GR24溶液的浓度为10^-6～10^-8mol/L，优选为10^-7mol/L；喷洒为每盆喷洒200ml；所述的亚精胺的添加量以花盆的体积为基准，浓度为0.2-0.4mg/m³,优选0.25mg/m³。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于包含以下步骤：

(1)将蛭石、沸石、浮石和草炭按3:3:3:1的体积比混成基质，灭菌后得到丛枝菌根真菌培养基质；

(2)选取玉米、万寿菊和三叶草作为寄主植物，挑选饱满、均一的玉米种子，采用浓度为1％的H₂O₂消毒10min，然后用蒸馏水清洗干净后浸泡4h于培养箱中28℃催芽；采用巴氏消毒液对花盆和苗床进行消毒；

(3)先装灭菌培养基质至培养容器高度的2/3～4/5，然后接种丛枝菌根真菌菌剂平铺其上，同时将GR24或亚精胺溶液均匀地喷洒到菌剂上，立即覆盖一层0.5～1.5cm厚的灭菌基质后开始播种玉米，带玉米出芽后干播万寿菊，万寿菊出苗后播种三叶草；待三叶草出苗1周后定苗；

(4)培养期间每周使用营养液灌溉1次，培养至第60～90d，打孔取样检测孢子密度，当孢子密度≧50个/g时，收获植物根系和培养基质，置于阴凉干燥处自然风干，混匀后得到丛枝菌根真菌扩繁菌剂。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于在步骤(1)中，灭菌温度为160℃，灭菌时间为4h。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于步骤(3)中，所述定苗为玉米为3～5株/盆，万寿菊2～5株/盆，三叶草为30～40株/盆。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(4)中，所浇的营养液为磷元素减半的Hoagland营养液，营养液的pH为6.45，每次每盆添加180-220ml,优选200ml。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(4)中，所述测定丛枝菌根真菌孢子密度的方法为湿筛倾析法和蔗糖离心法。