[发明专利]工程化脱羧酶多肽及其在制备β-丙氨酸中的应用有效
申请号: | 201710924714.5 | 申请日: | 2017-10-01 |
公开(公告)号: | CN109593748B | 公开(公告)日: | 2022-03-04 |
发明(设计)人: | 陈海滨;黄勇开;张迎新;郑文慧;章兆琪;何魁芳;张城孝;孙磊 | 申请(专利权)人: | 宁波酶赛生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12P13/06 |
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地址: | 315000 浙江省宁波市世纪大道*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 工程 脱羧酶 多肽 及其 制备 丙氨酸 中的 应用 | ||
1.一种工程化脱羧酶多肽,所述脱羧酶多肽在合适的反应条件下,能够以比SEQ IDNO:2更好的催化活性和/或稳定性将L-天冬氨酸脱羧生成β-丙氨酸,其中所述氨基酸序列是选自由以下组成的组的序列:SEQ ID No:48、50、52、54、60、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384所示的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的脱羧酶多肽,其中所述合适的反应条件包括约5g/L-400g/L的L-天冬氨酸的载量,约pH4.0-8.0,约10-60℃。
3.一种通过化学键或物理吸附的方法被固定在固体材质上的多肽,所述多肽选自权利要求1-2任一项所述的脱羧酶多肽。
4.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码权利要求1-2任一项的多肽。
5.如权利要求1所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸序列为对应SEQ ID No:47、49、51、53、59、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383的序列。
6.一种表达载体,所述表达载体包含权利要求4-5所述的多核苷酸。
7.如权利要求6所述的表达载体,所述表达载体包括质粒、粘粒、噬菌体或病毒载体。
8.一种宿主细胞,所述宿主细胞包括权利要求6-7任一项的表达载体,所述宿主细胞优选大肠杆菌(E.coli)。
9.一种脱羧酶多肽的制备方法,其包括如下步骤:培养权利要求8所述的宿主细胞,以及从培养物中获得脱羧酶多肽。
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