[发明专利]酶联免疫吸附测定溶液系统

说明书

本发明提供了生物科技领域内的酶联免疫吸附测定溶液系统，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。

技术领域

本发明属于生物科技领域，特别涉及酶联免疫吸附测定溶液系统。

背景技术

OTA广泛存在于粮谷类、葡萄干、可可、巧克力、咖啡、葡萄酒、调料、乳制品等多种食品和饲料中，可以通过食物链进入人和动物体内，具有蓄积毒性。饲料中OTA的污染较为严重，动物通过采食被污染的饲料摄入ota。研究发现，单胃动物摄入体内的OTA大部分通过血液被转移至肾脏，并在消化道和肾小管的近端和远端被吸收，OTA通过肝肠循环被反复分泌和吸收，位于肠道的微生物会把OTA转化成无毒性的代谢产物OTα；而进入血液的OTA与HAS紧密结合，在动物体内非常稳定，不易被代谢降解，因此动物性食品，尤其是猪的肾脏、肝脏、肌肉、血液等常有OTA检出。针对人体或动物体内可能存在OTA，需要制备出单克隆抗体。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的在于克服上述现有技术中OTA污染的技术问题，提供酶联免疫吸附测定溶液系统，本发明可提高人体或动物对抗OTA的免疫力。

本发明的目的是这样实现的：酶联免疫吸附测定溶液系统，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。

作为本发明的进一步改进，所述包被缓冲液由NaCO₃和NaHCO₃加入去离子水定容至1L制成。

作为本发明的进一步改进，所述封闭液一由蔗糖、酪蛋白、Na₂HPO₄•12H₂O、Na₂HPO₄•2H₂O、小牛血清、Proclin300和去离子水制成，去离子水为950mL；所述封闭液二由蔗糖、酪蛋白、Na₂HPO₄•12H₂O、Na₂HPO₄•2H₂O和Proclin300加入去离子水定容至1L而制成；其中，封闭液一和封闭液二中，所述蔗糖为50g，酪蛋白为2.5g，Na₂HPO₄•12H₂O为5.8g，Na₂HPO₄•2H₂O为0.593g，小牛血清为50mL，Proclin300为300μL；所述封闭液三由脱脂奶粉加去离子水定容至100mL制成，脱脂奶粉为5.0g；所述封闭液四由BSA加去离子水定容至100mL制成，所述BSA为1.0g。

作为本发明的进一步改进，所述磷酸盐缓冲液由NaCl、KCl和Na₂HPO4加去离子水定容至1L制成，所述NaCl、KCl和Na2HPO4分别为8.00g、0.20g和1.15g；所述底物缓冲液由Na₂HPO₄•12H₂O和柠檬酸加去离子水定容至1L制成，所述Na₂HPO₄•12H₂O和柠檬酸的重量分别为3.68g和0.94g。

作为本发明的进一步改进，所述TMB底物测定液由TMB储存液、底物缓冲液和30%H₂O₂制成，其中，所述TMB储存液、底物缓冲液和30% H₂O₂的容积分别为0.4mL、10mL和10μL。