[发明专利]一种早期广泛检测支原体的PCR方法有效
| 申请号： | 201710922669.X | 申请日： | 2017-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107604083B | 公开（公告）日： | 2021-02-12 |
| 发明（设计）人： | 冷小敏;倪文娟 | 申请（专利权）人： | 新乡医学院第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/35 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 453100*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 早期 广泛 检测 支原体 pcr 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一组可早期广泛检测支原体的引物组，其特征在于，包括正向引物F和反向引物R；正向引物F的序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物R的序列如SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述引物组在制备支原体检测试剂盒方面的应用。
3.一种早期广泛检测支原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述引物组；
所述试剂盒所使用的检测方法为：以样品DNA为模板，利用权利要求1所述引物组进行PCR扩增，根据扩增结果判断样品中是否含有支原体；
所述PCR扩增的反应体系为：正向引物F 1μL、反向引物R1μL、10×PCR buffer 2.5μL、dNTP 4μL、Ex-Taq 0.25μL、模板2μL、水补足25μL；其中正向引物F和反向引物R的浓度均为10nM；所述dNTP中四种脱氧核糖核苷三磷酸dATP、dGTP、dTTP、dCTP的浓度分别为2.5mM；
所述PCR扩增的反应程序为：94℃ 3分钟；94℃ 30秒，55℃~65℃ 30秒，72℃ 30秒，30个循环；72℃ 5分钟；4℃ 5分钟。
4.根据权利要求3所述试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：94℃ 3分钟；94℃ 30秒，57℃ 30秒，72℃ 30秒，30个循环；72℃ 5分钟；4℃ 5分钟。
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