[发明专利]可降解生物辅料及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药材料领域，具体涉及一种可降解生物辅料及其制备方法和应用。

背景技术

人体体表开放性外伤一般涉及皮肤、皮下组织和肌肉等组织器官的损伤。如何促进人体体表开放性外伤伤口的愈合是日常生活中最常见的问题之一。对于这一问题的解决，在外科临床上有很多的方案。然而，随着社会的发展，人们对医疗健康的质量要求永无止境。对于经医疗机构如医院处理的病例，外伤愈合基本都有保障。但是，对于一些比较轻微程度的外伤，出于节省治疗费用等原因，人们一般选择自行愈合的态度。所以，寻求更简便、效果更好、成本更低的治疗措施是永远的发展方向。目前，生物活性物质如种子细胞和生长因子等的介入，是目前相关研究的前沿热点问题之一。

目前用于生物医用领域的天然高分子主要包括多糖类和蛋白质类等，其中壳聚糖、丝素蛋白等在创面修复领域应用最为广泛。近十年来，丝素蛋白在纯化方面取得显著成功，被广泛应用到了生物材料，它们不仅具有很好的强度，而且展现出极佳的生物相容性。因此，基于丝素蛋白和壳聚糖的生物材料应用于创面修复和人造皮肤的理论依据已经得到证实，具备很好的前景，将成为未来培养人造皮肤最好的支架之一。丝素蛋白，是从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白，含量约占蚕丝的70％-80％，含有18种氨基酸，其中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和丝氨酸(Ser)约占总组成的80％以上。丝素本身具有良好的机械性能和理化性质，如良好的柔韧性和抗拉伸强度、透气透湿性、缓释性等，而且经过不同处理可以得到不同的形态，如纤维、溶液、粉、膜以及凝胶等。

目前医用敷料生物活性保持时间较短，所以开发一种如何持久抑菌和快速促进伤口愈合的可降解生物辅料具有很重要的临床意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种可降解生物辅料及其制备方法和应用，本发明的可降解生物辅料无毒性、无刺激，生物相容性好，具有持久的杀菌、止血和快速促进伤口愈合的功效。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种可降解生物辅料，所述组合物包括抗菌丝素膜、壳聚糖、成纤维细胞生长因子和水介质；所述抗菌丝素膜为抗菌肽改性的丝素蛋白膜；所述抗菌肽的序列如SEQ ID NO:1所示。

所述抗菌肽的序列为末端酰胺化的序列。氨基酸序列为：

Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-AsnLeu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser-NH₂。

所述抗菌肽为LL-37，LL-37是人体内发现的唯一一种Cathelicidin类抗菌肽，LL-37除了直接杀菌作用外，还能调节免疫和炎症介质的释放、引起免疫细胞分化及趋化、伤口愈合、细胞因子和组氨酸释放、中和内毒素和抗肿瘤等作用。LL-37的直接杀菌作用并不是它最重要的免疫方式，后几种作用才是LL-37参与免疫反应的主要途径。

经过抗菌肽改性丝素蛋白膜得到的抗菌丝素膜具有持久的杀菌和促进愈合的功能。

壳聚糖(CTS)是自然界中唯一含有氨基的阳离子多糖，能吸引带负电荷的血小板和红细胞，由于氨基的亲水性，能够增加纤维蛋白原的吸附数量，从而增加血小板黏附，壳聚糖具有促进组织再生、抑菌的特性，无毒，可生物降解，与生物组织的兼容性好。

在人体伤口愈合的过程中，成纤维细胞分泌胶原是伤口皮肤愈合的根本原因。所以，凡是促进皮肤成纤维细胞生长和分泌作用的因素均为备选的有利因素。成纤维细胞生长因子(FGF)不但可以有力的促进成纤维细胞的生长和分泌作用，同时，对肌肉等组织也有很强的促损伤修复功能。目前，FGF已经获我国Ⅰ类新药批文，这就为其在生物医药领域的广泛应用铺平了道路。

本发明的可降解生物辅料无毒性、无刺激，生物相容性好，具有持久的杀菌、止血和快速促进伤口愈合的功效。

进一步，所述抗菌丝素膜与壳聚糖的质量比为2～5:1～2。

进一步，所述成纤维细胞生长因子的浓度为0.005-0.02ug/ml。

本发明的目的之二在于提供一种所述的可降解生物辅料在制备用于促进伤口愈合的可降解生物辅料中的应用。

本发明的目的之三在于提供一种所述的可降解生物辅料的制备方法，包括以下步骤：

1)取丝素蛋白溶液干燥处理后，得丝素蛋白膜，将丝素蛋白膜经乙醇溶液处理后，得不溶于水的丝素；