[发明专利]一种用于对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行同时计数的培养基及其应用

说明书

本发明提供了一种用于对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行同时计数的培养基及其应用，该培养基是由盐酸林可霉素改良MRS琼脂后得到，本发明首创性的将盐酸林可霉素改良MRS琼脂后的培养基用于鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌的同时计数。本发明还进一步提供了应用上述培养基对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行同时计数的方法，首先取上述培养基并放置凝固得基础层，而后在基础层上加入待测混合样品和上述培养基并放置凝固得中间层，随后在中间层上加入上述培养基并放置凝固得表层，上述基础层、中间层与表层构成夹层平板，最后将夹层平板进行厌氧培养后，分别对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行计数。上述方法降低了实验器皿、实验试剂和人力资源成本。

技术领域

本发明属于菌种计数技术领域，具体涉及一种用于对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行同时计数的培养基及其应用。

背景技术

乳酸菌具有改善胃功能、调整肠道菌群、抑制病原菌生长、提高蛋白质和维生素代谢、防止便秘、缓解乳糖不耐症、抗肿瘤、增强免疫系统和降低胆固醇等功效，因此被越来越多的添加到食品和保健品中。嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜热链球菌等均属于乳酸菌，为了确保上述乳酸菌在人体内发挥正常的生理保健功能，食品组织和保健品组织均要求对乳酸菌产品中不同乳酸菌菌种的含量进行标识，因此，研究简便易行的乳酸菌计数方法，对于加强乳酸菌产品的监控、提高产品质量和保护消费者的利益及健康均具有极其重要的意义。

《中华人民共和国轻工行业标准QB/T 4575-2013》中公开了嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、双歧杆菌和嗜热链球菌等乳酸菌的计数方法，该计数方法通过利用选择性培养基，使目标菌生长，抑制非目标菌生长，以达到选择性计数的目的。例如，对于嗜酸乳杆菌与其他乳酸菌的混合产品的选择性检测，采用盐酸克林霉素和盐酸环丙沙星改性的MRS培养基进行厌氧培养以抑制除嗜酸乳杆菌外的其他乳酸菌生长，而此培养基上嗜酸乳杆菌生长良好，由此可实现嗜酸乳杆菌的选择性计数；对于鼠李糖乳杆菌与其他乳酸菌的混合产品的选择性检测，采用万古霉素改性的MRS培养基进行厌氧培养以抑制除鼠李糖乳杆菌外的其他乳酸菌生长，而此培养基上鼠李糖乳杆菌生长良好，由此可实现鼠李糖乳杆菌的选择性计数；对于双歧杆菌与其他乳酸菌的混合产品的选择性检测，采用莫匹罗星锂盐溶液改性的MRS培养基进行厌氧培养以抑制除双歧杆菌外的其他乳酸菌生长，而此培养基上双歧杆菌生长良好，由此可实现双歧杆菌的选择性计数。

然而，上述方法均只能针对单一菌种进行计数，而乳酸菌产品中含有的乳酸菌菌种种类较多，采用上述方法计数时，每一种乳酸菌菌种的选择性计数都需要单独进行检测实验，每个检测实验都需要配制合适的选择性培养基，不仅消耗大量的实验器材(例如实验器皿、实验试剂)，而且人力资源的成本也较高。因此，亟需研发一次检测实验可同时实现两种或两种以上乳酸菌菌种的计数方法，以达到降低实验器皿、实验试剂等的消耗，同时节省人力成本，提高工作效率的目的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术中乳酸菌产品的计数方法只能针对单一菌种进行计数，造成实验器皿、实验试剂和人力资源的成本较高的缺陷，进而提供一种混合样品中鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌同时计数的方法，从而降低实验器皿、实验试剂和人力资源的成本、提高工作效率使之有利于企业对乳酸菌菌种的计数。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案为：

一种用于对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行同时计数的培养基，所述培养基是由盐酸林可霉素改良MRS琼脂后得到。

上述培养基是通过如下方法制备：

(1)将MRS琼脂融化并在45℃～55℃下保温；

(2)向步骤(1)中加入浓度为0.005～0.01mg/mL的盐酸克林霉素溶液；其中，所述MRS琼脂与所述盐酸克林霉素溶液的体积比为100：(0.5～1.2)。

所述盐酸克林霉素溶液浓度为0.01mg/mL。