[发明专利]一种抗CA125的纳米抗体

说明书

技术领域

本发明涉及单域重链抗体技术（又称纳米抗体技术），以及基因工程抗体技术，特别是针对CA125的单域重链抗体或多肽。

技术背景

CA125 是一类大分子糖蛋白，其发现来源于1983年Bast等人用卵巢浆液性乳突囊腺癌细胞系 OVCA433，得到一株能稳定分泌特异识别卵巢癌细胞的单克隆抗体 OC125 细胞株，故将 OC125 所识别的抗原命名为癌抗原125 (cancer antigen 125，CA125)。约80%的上皮性卵巢癌患者血清CA125水平升高，血清CA125水平能够很好的反应机体肿瘤负荷，因此CA125是妇科最常用的血清肿瘤标志物。随着对CA125基因结构及功能的进一步深入研究，其在卵巢癌的早期诊断及生物学治疗中越来越重要的作用。

目前 CA125 的检测技术主要有放射性免疫法(RIA)，化学发光免疫法(CLIA)，酶联免疫免疫法(ELISA)等。检测中所使用的抗体大多是单克隆抗体和多克隆抗体，但单克隆抗体的研发和生产过程及其繁琐和复杂，多克隆抗体来源有限，这使得检测成本较高，不适合于基层医院进行大规模初筛和床旁快检。相比之下，单域重链抗体仅由一个结构域组成，具有耐酸碱、耐高温、特异性高、分子量小和可大规模生产等优点。单域重链抗体的使用可以很大的降低成本，应用前景广阔。

发明内容

本发明的目的是提供针对CA125的单域重链抗体，可以被用于制备检测CA125的试剂和工具。

本发明提供一个抗CA125的单域重链抗体（即本发明一种针对CA125的纳米抗体，下同），具有SEQ ID NO.:1所示的氨基酸序列。其氨基酸序列的IMGT编号和结构域的划分包括四个框架区（Framework region, FR）和三个互补决定区（Complementarity-determining region, CDR）。

本发明提供一个核酸分子，其特征是编码SEQ ID NO.:1，通过遗传密码子可以随时获得该核酸分子的具体序列。

本发明还提供一个核酸分子，其特征是编码SEQ ID NO.:1部分结构域，通过遗传密码子可以随时获得该核酸分子的具体序列。可以为SEQ ID NO.:2核酸分子。

本发明所提供的核苷酸序列或者至少部分序列可以通过合适的表达系统进行表达以得到相应的蛋白质或多肽。这些表达系统包括细菌，酵母菌，丝状真菌，动物细胞，昆虫细胞，植物细胞，或无细胞表达系统。

本发明还提供一种载体，包含所述核酸序列。由于遗传密码子具有简并性，该核酸序列可以根据不同的应用目的而不同。

本发明还提供一种宿主细胞，包括所述蛋白质或表达载体。

本发明还提供一种检测CA125的方法，含有本发明所述针对CA125的单域重链抗体。基于本发明提供的针对CA125的单域重链抗体与CA125特异性结合的能力，建立CA125的检测方法。其中，优选的方法包括酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），荧光免疫法（Fluoroimmunoassay, FIA），免疫芯片法，亲和层析法和免疫层析法等。

本发明所提供的氨基酸序列可以作为前体，通过随机或定点突变技术进行改造，能够获得性质（水溶性、稳定性、亲和力以及特异性等）更好的突变体，该突变体能与CA125特异性结合。

本发明所叙述的一些术语具有如下含义：

结构域：蛋白质三级结构的基本结构单位，通常具有一定的功能。