[发明专利]一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒，其特征在于，包括试剂条和金标微孔，所述试剂条包括底板，在所述底板上设置有层析膜，所述层析膜两端分别设有样品垫和吸水垫，所述层析膜上设有质控线C线和检测线，所述C线包被有羊抗鼠IgG抗体，所述检测线包括T₁线、T₂线，所述T₁线为莱克多巴胺检测线，包被有莱克多巴胺抗原，所述T₂线为沙丁胺醇、克伦特罗、溴布特罗、妥布特罗、马布特罗、特布他林、西布特罗、氯丙那林、西马特罗检测线，T₂线上包被有β-兴奋剂抗原，所述C线、T₁线、T₂线呈与试纸条长相垂直的三条平行带，所述金标微孔中含有胶体金标记的β-兴奋剂多克隆抗体和莱克多巴胺单克隆抗体；

所述莱克多巴胺抗原是莱克多巴胺半抗原与牛血清白蛋白的偶联物，所述β-兴奋剂抗原是具有苯乙醇胺母核结构的半抗原与牛血清白蛋白的偶联物；

在层析膜上自样品垫至吸水垫方向T₂线、T₁线和C线依次排布。

2.根据权利要求1所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒，其特征在于，所述的样品垫为玻璃纤维膜经浸渍处理后烘干得到。

3.根据权利要求1所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒，其特征在于，所述的层析膜为硝酸纤维素膜。

4.根据权利要求1所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒，其特征在于，所述的吸水垫为滤纸。

5.根据权利要求1所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒，其特征在于，所述莱克多巴胺单克隆抗体通过莱克多巴胺抗原免疫小鼠得到；所述β-兴奋剂多克隆抗体通过β-兴奋剂抗原免疫家兔得到；所述羊抗鼠IgG抗体通过鼠源抗体免疫羊得到。

6.一种如权利要求1-5任一项所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

1）胶体金溶液的制备：取1%的氯金酸溶液用双蒸水稀释100倍，加热搅拌煮沸，加入1%的柠檬酸三钠，继续加热搅拌至溶液颜色变红，停止加热，冷却至室温，得到胶体金溶液；

2）胶体金标记物的制备：向步骤1）所得胶体金溶液中加入β-兴奋剂多克隆抗体和莱克多巴胺单克隆抗体，再加入5%的牛血清白蛋白，离心后，取沉淀物加入pH 7.4的PBS缓冲液，再次离心，得到沉淀物，继续上述操作2-4次，将沉淀物用含2% BSA的PBS缓冲液溶解，过滤得到胶体金标记物，将胶体金标记物加入微孔中，冻干后得到金标微孔；

3）质控线和检测线的制备：将羊抗鼠IgG抗体包被于层析膜上形成质控线，将莱克多巴胺抗原包被于层析膜上形成T₁检测线，将β-兴奋剂抗原包被于层析膜上形成T₂检测线；

4）试剂条的组装：将样品垫、处理后的层析膜、吸水垫依次黏贴于底板上，组成试剂裸条卡，用切割机将卡片分切成试纸裸条，干燥后即得试剂条。

7.根据权利要求6所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，所述羊抗鼠IgG抗体通过点膜仪包被于层析膜上形成质控线。

8.根据权利要求6所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，所述层析膜与样品垫相邻部分有2 mm±0.5 mm的重叠。

9.根据权利要求6所述一种检测β-兴奋剂类药物的胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，所述层析膜与吸水垫相邻部分有2 mm±0.5 mm的重叠。