[发明专利]靶向PD-1或PD-L1且靶向VEGF家族的双靶向融合蛋白及其用途

权利要求书

1.靶向PD-1且靶向VEGF家族的双靶向融合蛋白，所述双靶向融合蛋白抑制PD-1与其配体的结合、且抑制VEGF家族的信号传导途径，其包含

(i)抗PD-1抗体；和

(ii)在所述抗PD-1抗体的两条重链中的每一重链的C端有效连接的一个抑制VEGF家族的结构域，其中所述抑制VEGF家族的结构域也缩写为VID，所述VID是人VEGFR1的免疫球蛋白样结构域2和人VEGFR2的免疫球蛋白样结构域3，为SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列；由此，两个相同的VID各自在它们的N端氨基酸处与所述抗PD-1抗体的重链之一的C端氨基酸通过肽接头有效连接，其中所述肽接头是选自SEQ ID NO：36－62的肽接头；

其中所述抗PD-1抗体包含SEQ ID NO：1/2的成对重链可变区序列/轻链可变区序列中所含的全部重链CDR与轻链CDR。

2.根据权利要求1所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体是IgG类抗体。

3.根据权利要求2所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体是IgG₁亚类、IgG₂亚类或IgG₄亚类抗体。

4.根据权利要求3所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体是IgG₄亚类抗体，且在Fc区中第S228位置处具有氨基酸置换。

5.根据权利要求4所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体是IgG₄亚类抗体，且在Fc区中第S228位置处具有氨基酸置换S228P。

6.根据权利要求1所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体的轻链型别为κ型或λ型。

7.根据权利要求1所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体包含SEQ ID NO：1/2的成对重链可变区序列/轻链可变区序列。

8.根据权利要求7所述的双靶向融合蛋白，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

9.根据权利要求1所述的双靶向融合蛋白，其是

由SEQ ID NO: 73的抗PD-1抗体轻链亚基和SEQ ID NO: 75的抗PD-1抗体重链-VID融合亚基组成的双靶向融合蛋白。

10.多核苷酸，其编码权利要求1－9中任一项所述的双靶向融合蛋白。

11.载体，所述载体包含权利要求10所述的多核苷酸。

12.根据权利要求11所述的载体，其是表达载体。

13.根据权利要求11所述的载体，其是具有双表达盒的谷氨酰胺合成酶表达载体。

14.宿主细胞，其包含权利要求10所述的多核苷酸或权利要求11－13中任一项所述的载体。

15.用于产生权利要求1－9中任一项所述的双靶向融合蛋白的方法，所述方法包括步骤(i)在适于表达所述双靶向融合蛋白的条件下培养权利要求14所述的宿主细胞，和(ii)回收所述双靶向融合蛋白。

16.药物组合物，其包含权利要求1－9中任一项所述的双靶向融合蛋白和可药用载体。