[发明专利]一种香蕉枯萎病菌培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种香蕉枯萎病菌培养基及其应用，所述培养基含有以下组分：葡萄糖的终浓度为10 g/L，天冬氨酸的终浓度为2～8 g/L，20×硝酸盐、200×铁盐、1000×维生素、1000×微量元素的体积分数分别为5%、0.5%、0.1%、0.1%；所述培养基的pH值为6.2～6.5。本发明提供的培养基既能促进香蕉枯萎病菌分生孢子的萌发，又能避免外源大分子蛋白质的干扰，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的分析。

技术领域

本发明涉及微生物培养技术领域，具体地，涉及一种香蕉枯萎病菌培养基及其应用。

背景技术

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. cubense，Foc）引起的一种真菌性病害，是香蕉生产上最重要的病害之一，在我国几乎所有的香蕉产区都有发生，发病蕉园的发病率一般为30～50%，重病区可达90%以上，严重威胁香蕉产业的可持续性发展。Foc主要通过分生孢子从香蕉的根部或伤口入侵，再进入维管束生长繁殖，进而导致香蕉维管束细胞褐变坏死，最终导致香蕉整株枯萎。由于Foc遗传背景复杂，目前对于其致病性机制仍不清楚。分泌蛋白质是指在细胞内合成后分泌到细胞外起作用的蛋白质，是植物病原真菌的一类重要致病因子；分泌蛋白在病原真菌对寄主植物的侵入、定殖和扩展等致病过程中均具有重要作用。因此，开展香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的研究有利于分析Foc的致病机理。但是，目前对于香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的分析尚缺乏成熟的研究体系，而培养基的成分对Foc分生孢子的萌发和分泌蛋白质的分析有很重要的影响。

目前常用的Foc培养基有：PDA培养基（马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉20 g，用蒸馏水定容至1 L）；查氏培养基（NaNO₃ 3 g、K₂HPO₄ 1 g、KCl 0.5 g、MgSO₄·7H₂O 0.5 g、FeSO₄·7H₂O 0.018 g、蔗糖30 g，用蒸馏水定容至1 L，pH 6.0）；CM培养基（葡萄糖10 g、蛋白胨2 g、酵母浸膏1 g、酪蛋白水解物1 g、20×硝酸盐50 mL、1000×维生素1 mL、1000×微量元素1 mL，用蒸馏水定容至1 L，pH 6.5）；Bilai’s培养基（KH₂PO₄ 1 g、KNO₃ 1 g、KCl 0.5g、MgSO₄·7H₂0 0.5 g、淀粉0.2 g、葡萄糖0.2 g、蔗糖0.2 g，用蒸馏水定容至1 L）。在这些现有的香蕉枯萎病菌培养基中，有多种因素干扰Foc分泌蛋白质的研究：其中，PDA培养基和CM培养基中的部分组分（马铃薯、蛋白胨和酵母浸膏等）含有复杂的蛋白质组分；含无机盐的培养基（查氏培养基和Bilai’s培养基），则存在Foc分生孢子萌发率偏低的问题，这些因素均是干扰Foc分泌蛋白质分析的重要因素。而现有技术中，尚未见文献和专利报道既适合于香蕉枯萎病菌分生孢子萌发同时又有利于其分泌蛋白质分析的培养基。

发明内容

本发明为了克服现有技术的上述不足，提供一种香蕉枯萎病菌培养基，本发明所提供的培养基既能促进香蕉枯萎病菌分生孢子的萌发，又能避免外源大分子蛋白质的干扰，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的分析。

本发明的另一目的是提供上述培养基在提高香蕉枯萎病菌孢子萌发率以及在香蕉枯萎病菌分泌蛋白质分析中的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

一种香蕉枯萎病菌培养基，含有以下组分：葡萄糖的终浓度为10 g/L，天冬氨酸的终浓度为2～8 g/L，20×硝酸盐、200×铁盐、1000×维生素、1000×微量元素的体积分数分别为5%、0.5%、0.1%、0.1%，去离子水余量；所述培养基的pH值为6.2～6.5。