[发明专利]一种时钟基因表达量的调整剂及其制备方法

说明书

本发明属于生物制剂领域，具体涉及一种能够调整时钟基因Clock和Bmal1的表达量的调整剂及其制备方法。所述的调整剂为石斛提取物，更进一步为石斛多糖。本发明首创性地发现石斛多糖能够促进Clock和Bmal1的表达，同时也能够促进保湿相关基因Aqp3的表达。本发明提供的调整剂能够有效的促进时钟基因Clock和Bmal1的表达，这两个基因形成Clock/Bmal1异二聚体以促进Per和Cry基因的转录，而Cry与Per基因形成的异源二聚体过量时，又能抑制BMAL和CLOCK的活性，进而形成在24小时期间波动的反馈回路。

技术领域

本发明属于生物制剂领域，具体涉及一种能够调整时钟基因Clock和Bmal1的表达量的调整剂及其制备方法。

背景技术

生物钟又称生理钟，是生物体内的一种无形的时钟，实际上是生物体生命活动的内在节律性，它是由生物体内的时间结构序所决定。

地球上几乎所有的活的生物体都具有内在的“生物钟”，其在约24小时的周期内自主地波动。生物钟引起称为昼夜节律的生物学上的每日波动，其被认为控制多种生物学现象(活性)的昼夜变化，这些生物学现象不仅包括生物的睡-醒周期，还包括体温、血压、激素分泌、新陈代谢、以及心理活动和身体活动、进食以及皮肤的一些生理指标如：pH、经皮失水量、血流量以及皮脂分泌量等。

其中，时钟基因Clock和Bmal1形成Clock/Bmal1异二聚体，通过与Cry和Per基因启动器的响应元件E-box结合，激活这些基因的转录，而形成的Per及Cry蛋白反馈抑制了基因的继续转录,时钟基因就是通过这种核心反馈循环来调节生物节律的产生，在生命活动以及皮肤节律中起着重要的调节作用。

已有文献报道昼夜节律和皮肤节律具有密切的联系，皮肤的一些生理指标在早晚存在明显差异。Kondratov等人通过敲除小鼠体内Bmal1基因之后观察小鼠，发现小鼠的毛发生长受阻，皮肤出现萎缩状态，可知时钟基因在调节皮肤状态方面起着重要的作用。并且Lin等人研究发现CLOCK和BMAL1基因突变小鼠显示毛囊生长进展的延迟，并且次级毛芽细胞显示降低水平的磷酸化Rb和缺乏有丝分裂细胞，这表明生物钟基因调节毛囊生长进展。K.Izumi等人在使用正常人皮肤成纤维细胞的试验中，报道了Ⅰ型胶原基因以昼夜节律表达，其表达模式与时钟基因Period2的表达模式相似。Ando等人研究了核心昼夜节律基因是否对银屑病的发展有调节作用，发现时钟基因是一个新的调节银屑病的通路，通过在γ/δ+T细胞表达的直接调制IL-23R小鼠皮肤炎症，建立银屑病与生物钟之间的一个联系。另外，遗传证据表明，昼夜节律机制的破坏使我们的细胞更容易受到癌症的形成，Lengyel等人探讨生物钟基因表达模式之间的关系，通过分析恶性黑色素瘤和良性痣瘤人体皮肤活检和肿瘤的发展，为生物钟基因与人类皮肤肿瘤之间的联系提供证据。由此可见，时钟基因在我们皮肤调节、改善皮肤状态、睡眠调节和疾病预防治疗等方面具有非常重要的影响作用。

目前报道的对于时钟基因表达量有调整作用的物质主要为一些芳香植物的提取物或油性植物(如橄榄)提取物。

例如，中国专利申请201180017292公开了一种时钟基因Period的表达调节剂，选自以下的物质：阿尼菊提取物(arnica extract)、日本萍蓬草提取物(nuphar extract)、黑茶提取物、花椒提取物(Zanthoxylum extract)、刺柏油(juniper oil)、雪松油(cedaroil)、熏衣草油、丁香花蕾油(clove bud oil)、柏木油、玫瑰油、依兰油、格蓬油(galbanumoil)、卑柠油、胡椒油、百里香油、罗勒油和β-石竹烯。

再例如，中国专利申请201480047151公开了一种时钟基因的表达量调整剂，其特征在于，含有选自橄榄苦苷、3,4-二羟基苯乙醇-橄榄酸及它们的衍生物以及上述物质的盐中的一种以上的化合物，其作用是将Per基因和Bmal基因的表达量调节为相反相位，由此使Per基因及Bmal基因的表达节律同步为正常相位。