[发明专利]用于保存异种移植瘤的冻存液及其冻存与复苏方法

权利要求书

1.一种用于保存异种移植瘤的冻存液，其特征在于包括以体积百分比计的如下组分：5％-15％的二甲基亚砜，余量为胎牛血清。

2.如权利要求1所述的用于保存异种移植瘤的冻存液，其特征在于其是按照如下方法制备得到的：在胎牛血清中加入二甲基亚砜，使二甲基亚砜的体积百分含量为5％-15％。

3.如权利要求1所述的用于保存异种移植瘤的冻存液，其特征在于二甲基亚砜的体积百分百含量为10％。

4.如权利要求1所述的用于保存异种移植瘤的冻存液，其特征在于所述胎牛血清为购自美国Invitrogen公司货号为16000-044的Gibco胎牛血清。

5.如权利要求1所述的用于保存异种移植瘤的冻存液在保存肿瘤患者来源用于异种移植的肿瘤块中的应用。

6.一种保存肿瘤患者来源异种移植瘤块的冻存方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将肿瘤患者来源的待移植瘤块取下，置于含DMEM培养基的培养皿中；

2)清除新鲜移植瘤块表面包膜，去除肿瘤坏死组织，剪成18-27mm³大小；

3)将瘤块放入装有用于保存异种移植瘤的冻存液的冻存管中；

4)将冻存管放入预冷好的冻存盒中，并将冻存盒放到-80℃冰箱内，放置12-24小时；5)将冻存管转移入液氮罐中。

7.如权利要求6所述的保存肿瘤患者来源异种移植瘤块的冻存方法，其特征在于步骤1)中所述肿瘤患者为小鼠肿瘤患者。

8.如权利要求6所述的保存肿瘤患者来源异种移植瘤块的冻存方法，其特征在于步骤3)中所述预冷冻存盒是将冻存盒置于0-4℃，15-45分钟。

9.一种冻存肿瘤患者来源异种移植瘤块的复苏方法，其特征在于包括如下步骤：

i)将保存于液氮中的冻存管取出，于36-38℃水浴，摇动，1-2分钟；

ii)将融化好的瘤块放到培养皿内，用水浴好的DMEM培养基冲洗1-3遍；

iii)将冲洗好的瘤块，放入到Matrigel和DMEM培养基体积比为1:1-2:1的混合物中，并置于冰上，复苏完成；

其中，步骤i)中所述冻存管内的冻存液为权利要求1中所述用于保存异种移植瘤的冻存液。