[发明专利]一种多重单管逆转录聚合酶链式反应检测咽拭子上呼吸道感染病毒检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物医学临床分子检测领域，具体涉及一种多重单管逆转录聚合酶链式反应检测咽拭子上呼吸道感染病毒检测试剂盒。

背景技术

呼吸道感染病原学复杂，但其中80%以上是病毒性的。该病没有季节和年龄年龄限制，通过含有病毒的飞沫、雾滴，或经污染的用具进行传播。常于机体抵抗力降低时，原已存在或由外界侵入的病毒，迅速生长繁殖，导致感染，一般5-7天痊愈。儿童和老人由于机体抵抗力低，更易发病。除继发支气管炎、肺炎、副鼻窦炎，少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风湿热等。呼吸道感染是世界范围内低龄儿童（<5岁）死亡的首位原因，每年可造成约5百万儿童死亡。儿童上呼吸道感染的患病次数平均为3-8次/年，下呼吸道感染率比上呼吸道感染率低，在1岁儿童中感染的比例约1~3%，学龄儿童至5~10%。呼吸道病毒习惯上是指侵害呼吸道的病毒。临床常见的可导致呼吸道感染的病毒有腺病毒(ADV)、流感病毒(FluA和FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒1-3型(PIVl-PIV3)、鼻病毒(hRV)等。

腺病毒（Adenovirus， ADV）是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，线状双链DNA病毒。分为两个属，6个亚群（A-F），包括51个血清型。腺病毒通过人、水、媒介物和器械传播。腺病毒在儿童和军营人员中更易发生感染和大规模流行, 大多数婴幼儿在出生后的5年内至少感染过1种腺病毒株。该病毒可导致肺炎、发热上呼吸道疾病、结膜炎、膀胱炎、肠胃炎等，根据感染者的免疫和心肺功能的不同可导致严重的呼吸窘迫甚至死亡。ADV感染全年散发，冬春季相对较多，阳性检出率最高可达15%。

流感病毒（Influenza virus，Flu）主要包括内部的核心和外部的病毒囊膜，核心是由核蛋白卷曲包绕螺旋形RNA组成。核蛋白具有型特异性，根据核蛋白抗原性的不同，将流感病毒分甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，三型病毒具有相似的生化和生物学特征。猪和禽类可携带甲型流感，乙、丙型流感仅在人之间转播。甲型和乙型流感的临床症状相似，但是甲型流感病毒导致的住院率四倍于乙型流感病毒。乙型流感通常有肌炎及胃肠道症状。丙型流感很少有下呼吸道症状，但偶尔会造成上呼吸道疾病。可引起急起高热、显著乏力，全身肌肉酸痛，而鼻塞、流涕和喷嚏等上呼吸卡他症状相对较轻。本病具有自限性，但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发症而导致死亡。世界卫生组织估计北半球每年1亿人感染流感，5000万次就诊，30万次住院，主要是高危人群和老年人，每年1万人死于流感，主要是虚弱的老年人。

呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）是一种RNA病毒。多见于新生儿和6 个月以内的婴儿，可由空气飞沫和密切接触传播，潜伏期3～7日，传染性强。RSV分为A、B两个亚型, RSV是世界各地婴幼儿病毒性肺炎和毛细支气管炎的主要病原体之一，严重威胁婴幼儿健康，尤其是早产儿、先天性心脏病患儿、免疫缺陷的婴儿。成人和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。有研究表明RSV流行季节集中于每年的冬春季(11月至翌年3月，高峰出现在12月至翌年1月)，我国北京地、杭州、苏州及其他温带国家(如日本、美国)均一致，就诊的儿童患者阳性率可达42.50% 。

副流感病毒（Parainfluenza virus，PIV）多形有包膜的病毒, 直径约125～250 nm, 负单链RNA 基因组, 核衣壳蛋白紧密包饶。可通过人与人直接接触或飞沫传播, 进入人体于呼吸道上皮细胞中增殖。PIV可引起所有年龄组的人上呼吸道感染, 尤其是可引起婴幼儿及儿童哮喘、细支气管炎和肺炎, 更易于引起严重下呼吸道感染, 并可引起急中耳炎, 与急性和慢性神经系统疾病有关。PIV是常见的社区获得性呼吸道感染的病原, 2岁以下的儿童感染率最高, 成人感染较少。根据遗传学和血清学可分为4型, PIV 1～4,每种亚型主要的结构和生物学特征相似，但流行病学和所引发疾病的临床特征有差异。

人鼻病毒（ human Rhinovirus，hRV）核心为无折叠的单股正链RNA, 长约7200bp。hRV是致呼吸道感染病毒中重要的致病因子, 可引起急、慢性呼吸道感染, 严重时会引发哮喘、慢性阻塞性肺炎等临床疾病。hRV 感染后常表现为感冒症状, 大约有10 ~20%的成年人感冒是由hRV 感染引起, 而婴幼儿感冒有15~30% 是由hRV 致病。hRV的感染具有自限性, 多与其它呼吸道病毒合并感染, 例如呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、冠状病毒以及肠道病毒等。

发明内容