[发明专利]B12蛋白表达抑制剂及其在结核病免疫和治疗中应用

说明书

本发明公开了B12蛋白表达抑制剂及其在结核病免疫和治疗中的应用。本发明发现B12能介导结核病免疫过程，可能通过CD272使结核感染的免疫记忆弱化，从而导致MTB的免疫耐受；因此，有望通过制备抑制B12蛋白表达的物质、或使B12蛋白活性降低或失活的物质、或促进B12蛋白降解的物质，用于增强结核病患者的免疫力，同时达到治疗结核病的效果。此外，本发明研究发现miR‑16能够靶向B12，并且含有miR‑16基因的慢病毒可以降低肺结核患者T淋巴细胞的B12表达量，因此，可以将miR‑16应用于B12蛋白表达抑制剂的制备中。

技术领域

本发明属于生物工程领域，更具体地，涉及B12蛋白表达抑制剂及其在结核病免疫和治疗中的应用。

背景技术

据统计，全球有1/3的人口感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)，约5％～10％感染人群发展为结核病(Tuberculosis，TB)。结核病是威胁全球人类健康的公共卫生问题，全球每年新发结核病患者约900万，其中死亡约150万。目前，对于结核病的发病、归转及预后机制尚研究较少。现有研究表明，感染MTB的患者会出现MTB介导的免疫细胞功能弱化或功能受限的情况，如果无法完全清除MTB，则形成结核性肉芽肿，发展为MTB潜伏感染者，机体免疫力低下后发展成活动性结核病(Active tuberculosis，ATB)患者。因此，通过解除MTB介导的免疫耐受，增强机体免疫能力，对于结核病治疗非常有益。

TNF-α诱导蛋白1(B12)又名TNFAIP1(tumor necrosis factor-alphainducedprotein 1)，是第一个被鉴定出的TNF-α诱导产生的蛋白，参与DNA复制、合成、细胞凋亡，在许多疾病特别是自身免疫性疾病和肿瘤的发生、发展中发挥重要的作用。结核免疫是由免疫细胞、免疫分子及细胞因子参与的十分复杂的免疫调控过程。其中，T淋巴细胞是MTB特异性细胞免疫的主导细胞，在抗结核免疫中发挥重要作用，目前尚没有B12参与结核免疫的报道。CD272又称B和T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuator，BTLA)，属于免疫共抑制分子，在T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核-巨噬细胞、DC细胞以及NK细胞中均表达。此前研究表明，CD272介导了MTB抗原记忆性T细胞发育、耗竭和功能弱化过程，CD272的表达对于结核感染的免疫记忆至关重要(Zeng JC，Lin DZ，Yi LL，et al.BTLA exhibits immunememory forαβT cells in patients with active pulmonary tuberculosis.Am JTransl Res.2014，6(5)：494-506.)，影响着结核的免疫耐受。

此外，miRNAs在抗结核免疫过程中也发挥重要的作用。MicroRNAs(miRNAs)是一类约22个核苷酸组成的非编码小RNAs，通过碱基互补配对靶向mRNAs的3’-非转录区(3’-UTR)，直接降解mRNA或者抑制翻译，从而完成对靶基因的转录后调控，对生物体基因的整体表达模式有着巨大影响。miR-16定位于人染色体13q14，随着研究方法和技术的不断进步，人们对miR-16的认识越来越深入，研究表明miR-16可通过靶向调节BCL2，CCND1和WNT3A等基因参与调控诸多肿瘤细胞系的增殖、周期和凋亡，另外，相关研究还发现miR-16亦通过调节诸多基因的表达参与机体免疫反应。如，研究发现miR-16可靶向作用PDCD4基因3’-UTR区，下调PDCD4表达进而调节功能。然而，目前并没有miR-16靶向B12参与结核免疫和治疗的报道。

发明内容

本发明的一个目的在于提供B12在结核病免疫和治疗中的应用；

本发明的另一目的在于提供一种B12蛋白抑制剂。

本发明所采取的技术方案是：

以下任一物质在制备结核病免疫增强剂或治疗药物中的应用：1)抑制B12表达的物质；2)使B12蛋白活性降低或失活的物质；3)促进B12蛋白降解的物质。