[发明专利]一种用于诊断SFTS患者预后情况的蛋白质及其应用

说明书

本发明涉及一种用于诊断SFTS患者预后情况的蛋白质及其应用，实施蛋白质包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的肽段；还涉及使用该蛋白质制备的检测试剂盒。通过本发明的蛋白质及试剂盒，可检测SFTS患者体内是否存在保护性抗体，判断该患者的预后情况。当本发明的试剂盒检测为阳性时，患者预后良好，都能存活，当检测结果为阴性时，患者预后不良，80％的阴性患者都死亡，可见本发明的试剂盒具有对SFTS患者具有可靠的预后判断能力。检测结果呈阳性的SFTS病人可以采取保守治疗，呈阴性的SFTS病人，应采取应急治疗。

技术领域

本发明涉及SFTS治疗和诊断领域，更特别地，涉及一种用于诊断SFTS患者预后情况的蛋白质及其应用，还涉及包含该蛋白质的ELISA检测试剂盒。

背景技术

自2004年以来，我国多地发生了一系列发热伴出血、白细胞减少及血小板减少、多脏器受损的病例。患者多来自华中山区，农业区，流行时间为每年的4到8月份，与节肢动物活动繁殖期相吻合，病例都有明确的蜱虫叮咬里是，其发病死亡率为12％-30％。该病的其他症状有胃肠不适、纳差厌食、恶心、腹泻、疲劳乏力、相对缓脉等，实验室检查发现白细胞减少和酶学改变等，其中，丙氨酸转氨酶(alanine transaminase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)和肌酸激酶(creatine kinase，CK)均有升高。所述症状与感染嗜中性粒细胞无形体(anaplasmaphagocytophilum)的患者相似，但经国家疾控中心相关研究证实，该病病原体是一种新的布尼亚病毒，又称发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever withthrombocytopenia syndrome bunyavirus，sftsv)，属于布尼亚病毒科蛉热病毒属的一种新病毒。

与其它布尼亚病毒科白蛉热病毒属病毒类似，sftsv是一种球形、有包膜的负链RNA病毒，直径90-100nm，基因组RNA分为大(L)、中(M)、小(s)3个节段。L节段碱基长度是6368bp，其中包含2084个氨基酸的编码框；M节段碱基长度为3378bp，其中编码两种糖蛋白(Gn、Gc)的前体；S节段长为1744bp，编码核蛋白(Nucleocapsid protein，NP)和非结构蛋白NSs蛋白。

可用于新布尼亚病毒检测或确认的方法有病毒分离、免疫荧光检测(immunofluorescence assay，IFA)、酶联免疫吸附检测(enzyme—linked immunosorbentassay，ELISA)、微量中和检测(microneutralization test，MNT)及分子生物学方法(reverse transcription polymerase chain reaction，RT—PCR)。

基于RT-PCR的检测标准已经建立，但是该方法操作复杂，依赖贵重仪器，不便于区县医院推广检测，另外RT-PCR只能说明病毒存在体内感染，不能说明病毒在体内复制状态以及既往感染水平和疫苗的保护作用。

ELISA方法操作简便，不依赖贵重仪器，目前的ELISA主要是检测病毒的NP抗原以及针对NP的抗体，由于NP抗原为病毒核衣壳抗原，因此针对NP抗原的ELISA检测试剂盒确实能够给PCR检测提供印证病毒感染的方法，但不能提供体内保护抗体的水平；由于NP蛋白为核衣壳蛋白，不直接参与病毒吸附侵入感染细胞的过程，针对NP的抗体不能阻止病毒感染机体，因此检测针对NP的抗体ELISA试剂盒只能反应体内免疫系统对病毒的抗体反应，不能直接反应保护抗体的水平。

发明内容