[发明专利]基于石墨烯量子点与铕离子复合体系的四环素类抗生素检测方法

说明书

本发明提供了一种基于石墨烯量子点与铕离子复合体系的四环素类抗生素检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A.制备石墨烯量子点溶液；B.制备铕离子溶液；C.制备不同浓度的盐酸四环素溶液；D.将石墨烯量子点溶液和铕离子溶液混合得到复合体系溶液；E.将不同浓度的盐酸四环素溶液依次与复合体系溶液混合，通过荧光分析法绘制盐酸四环素浓度的标准曲线；F.将未知浓度的盐酸四环素溶液与复合体系溶液混合，通过荧光测试得到荧光强度值，通过与标准曲线的比对得到浓度数据。本发明的信号输出方式为比率荧光型，并具有操作简便、耗时短、灵敏度高以及干扰小等优点。

技术领域

本发明属于化学检测领域，具体涉及一种基于石墨烯量子点与铕离子复合体系的四环素类抗生素检测方法。

背景技术

四环素类抗生素是由放线菌产生的一类广谱抗生素，包括金霉素、土霉素、四环素及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素、二甲胺基四环素等，其结构均含并四苯基本骨架。作为一种广谱抗生素，四环素类抗生素的滥用造成的污染已经引起了人们的关注。

目前常见的四环素类抗生素的分析检测方法有液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、毛细管电泳法、比色法以及荧光分析法等。然而这些方法普遍存在一些缺点，例如色谱法和电泳法操作复杂、所需分析时间较长，比色法灵敏度不够等。荧光分析法操作简单且灵敏度较高，因此开发四环素类抗生素的荧光分析方法具有重要的意义。现有的针对抗生素的荧光分析方法大概分为两类，一类是利用四环素抗生素对荧光纳米材料（例如荧光碳点）的猝灭而建立（X. Yang, Y. Luo, S. Zhu, Y. Feng,Y. Zhuo,Y. Dou, One-potsynthesis of high fluorescent carbon nanoparticles and their applications asprobes for detection of tetracyclines, Biosen. Bioelectron. 56 (2014) 6–11.），另一类方法是利用铕离子与四环素可以形成发光配合物而建立（L. D. S. Teixeira, A.N. Grasso, A. M. Monteiro, A. M. F. Neto, N. D. Vieira Jr., M. Gidlund, L. C.Courrol, Enhancement on the Europium emission band of Europiumchlortetracycline complex in the presence of LDL, Anal. Biochem. 400 (2010)19–24.）。第一类荧光分析方法信号输出方式为荧光减弱型，第二类荧光分析方法因为铕离子与四环素形成的发光配合物荧光强度较弱，需要寻找并在体系中加入能够增强铕发光配合物荧光的物质。

本发明在以上问题上进行了研究。

发明内容

针对以上现有技术中的不足，本发明提供了一种基于石墨烯量子点与铕离子复合体系的四环素类抗生素检测方法，本发明通过下述技术方案得以解决。

基于石墨烯量子点与铕离子复合体系的四环素类抗生素检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A.制备石墨烯量子点溶液；B.制备铕离子溶液；C.制备不同浓度的盐酸四环素溶液；D.将石墨烯量子点溶液和铕离子溶液混合得到复合体系溶液；E.将不同浓度的盐酸四环素溶液依次与复合体系溶液混合，通过荧光分析法绘制盐酸四环素浓度的标准曲线；F.将未知浓度的盐酸四环素溶液与复合体系溶液混合，通过荧光测试得到荧光强度值，通过与标准曲线的比对得到浓度数据。

作为优选，所述步骤A中，制备石墨烯量子点溶液包括以下步骤：A1.取固体柠檬酸放入烧杯中，将该烧杯放在加热套中200℃加热，直柠檬酸变成液态，颜色由无色变为淡黄色；A2.将熔化的柠檬酸与氢氧化钠溶液混合，得到石墨烯量子点溶液。

作为优选，所述步骤A2中，柠檬酸与氢氧化钠溶液混合操作如下：将烧杯连同熔化的柠檬酸置于盛有10mg/mL氢氧化钠溶液的容器中，并将烧杯倾斜，使容器中的氢氧化钠溶液缓慢进入到烧杯中，得到石墨烯量子点溶液。