[发明专利]检测尿液中versican V1 mRNA的试剂盒及其应用

说明书

本发明属于医学检测领域，特别涉及检测尿液中versican V1mRNA的试剂盒及其应用，采集患者尿液，测定尿沉渣versican V1mRNA水平；结果显示FSGS患者尿沉渣versican V1mRNA水平显著增高，而微小病变肾病(MCD)患者尿沉渣versican V1mRNA水平无变化；FSGS患者尿沉渣versican V1mRNA水平与患者小管间质纤维化评分相关，且与患者随访中eGFR下降率显著相关；因此尿液中versican V1mRNA的表达量可用于FSGS患者的预后诊断；检测尿液中versican V1mRNA表达量的试剂可用于制备检测试剂或检测试剂盒；实现了FSGS预后判断的无创诊断。

技术领域

本发明属于医学检测领域，特别涉及检测尿液中versican V1mRNA的试剂盒及其在局灶节段肾小球硬化症预后诊断中的应用。

背景技术

局灶节段肾小球硬化症(Focal Segmental Glomerular Sclerosis,FSGS)是一种典型的足细胞病。患者多为非选择性蛋白尿，起病时高血压和肾功能损害较多见，常伴有肾小管功能损伤。病理上，FSGS患者可见肾小球局灶节段样病变和小管间质急慢性病变。FSGS虽与微小病变肾病(minimal change disease,MCD)同属于足细胞病，但临床病理损伤重于MCD，远期预后差于MCD。慢性小管间质病变程度与FSGS疾病预后密切相关。找到FSGS患者小管间质纤维化和预后判断的无创诊断标志物，具有重要的现实意义。

细胞外基质是分布于细胞外空间，由细胞分泌的蛋白和多糖所构成的网络结构。细胞外基质将细胞粘连在一起构成组织，同时提供一个细胞外网架，在组织中或组织之间起支持作用。它由许多不同的多功能胶原超家族分子和非胶原基质分子组成，包括透明质酸、蛋白聚糖和糖蛋白等。细胞外基质蛋白versican是一种分子量很大的硫酸软骨素蛋白聚糖，由一个蛋白核心和连接在其上的12-15个硫酸软骨素侧链所构成的。Versican mRNA的选择性拼接，可以产生四种亚型，即V0、V1、V2和V3。它们的核心蛋白分子量分别为370KDa、263KDa、180KDa及74KDa。

既往Bukong TN等人报道，肝纤维化过程中肝星状细胞versican表达增加，敲低肝星状细胞中versican表达量可以显著抑制肝脏纤维化(参见文献Bukong TN,Maurice SB,Chahal B,Schaeffer DF,Winwood PJ.Versican:a novel modulator of hepaticfibrosis.Lab Invest.2016.96(3):361-74.)。Rienstra H等报道，在实验性大鼠移植肾小管间质纤维化中硫酸软骨素蛋白聚糖versican表达量显著增加(参见文献Rienstra H,Katta K,Celie JW,et al.Differential expression of proteoglycans in tissueremodeling and lymphangiogenesis after experimental renal transplantation inrats.PLoS One.2010.5(2):e9095)。Rudnicki M等人报道，肾组织中versican V0和V1的表达与慢性肾脏疾病的进展相关(参见文献Rudnicki M,Perco P,Neuwirt H,etal.Increased renal versican expression is associated with progression ofchronic kidney disease.PLoS One.2012.7(9):e44891.)。

发明内容

本发明解决现有技术中存在的上述技术问题，为FSGS患者预后判断提供了无创诊断标志物versican V1 mRNA、检测尿液中versican V1 mRNA的试剂盒及其在FSGS预后诊断中的应用。

为解决上述问题，本发明的技术方案如下：