[发明专利]一种核酸纳米结构及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710859574.8 | 申请日： | 2017-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN107488661B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 丁宝全;湛鹏飞;李娜;王振刚;蒋乔;王婷 | 申请（专利权）人： | 国家纳米科学中心 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10;B82Y5/00;B82Y40/00;G01N21/65;B22F9/24;B22F1/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 100190 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 纳米 结构 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种金蝴蝶结结构，其特征在于，所述金蝴蝶结结构包括贵金属纳米结构和核酸纳米结构，所述贵金属纳米结构表面修饰有寡核苷酸序列，所述贵金属纳米结构与所述核酸纳米结构通过寡核苷酸序列进行组装；
所述核酸纳米结构为通过DNA折纸技术构建的六个三角形DNA折纸结构组装形成的六边形DNA纳米结构，其是通过脚手架链与订书钉链和捕获链进行杂交，再通过连接链分别与六个三角形DNA折纸结构的脚手架链杂交而自组装形成的六边形DNA纳米结构；
所述贵金属纳米结构为表面酸性修饰有巯基化DNA序列的金棱柱，所述巯基化DNA序列与所述捕获链互补；
所述金棱柱为金三棱柱。
2.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述核酸纳米结构的边长为100-150nm。
3.根据权利要求2所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述核酸纳米结构的边长为120nm。
4.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述脚手架链与所述订书钉链、所述脚手架链与所述捕获链、所述脚手架链与所述连接链通过碱基互补配对原则进行杂交。
5.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述脚手架链为M13噬菌体基因组DNA。
6.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述订书钉链为人工合成的寡核苷酸序列。
7.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述捕获链为人工合成的寡核苷酸序列。
8.根据权利要求1所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述连接链包含二硫键和/或限制性内切酶的特异性识别位点。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，所述核酸纳米结构的制备方法包括以下步骤：
(1)将所述脚手架链溶液与所述订书钉链、捕获链和连接链的混合溶液按照摩尔比为1:(1-20)混合均匀；
(2)以85-98℃为起始温度退火至15-30℃，采用离心柱离心去除过量的订书钉链和捕获链；
(3)将纯化后的六种三角形DNA折纸结构等量混合后，以40-50℃为起始温度退火至20-30℃，进行梯度PCR循环，制得所述核酸纳米结构。
10.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(1)所述脚手架链溶液与所述订书钉链、捕获链和连接链的混合溶液的摩尔比为1:(1-10)。
11.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(1)所述脚手架链溶液与所述订书钉链、捕获链和连接链的混合溶液的摩尔比为1:2。
12.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的起始温度为90-98℃。
13.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的起始温度为95℃。
14.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的终点温度为15-25℃。
15.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的终点温度为20℃。
16.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的持续时间为5-20h。
17.根据权利要求9所述的金蝴蝶结结构，其特征在于，步骤(2)所述退火的持续时间为8-15h。
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