[发明专利]一种用于基因转染中可光场调控基因快速释放的方法有效
申请号: | 201710851642.6 | 申请日: | 2017-09-19 |
公开(公告)号: | CN107723305B | 公开(公告)日: | 2020-10-16 |
发明(设计)人: | 程逵;姚利利;翁文剑 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 万尾甜;韩介梅 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 基因 转染 中可光场 调控 快速 释放 方法 | ||
1.一种用于基因转染中可光场调控基因快速释放的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以具有光伏效应的p+/n型或n+/p型硅基板表面作为基因承载平台,在硅基板上吸附质粒或质粒/载体复合物,然后进行细胞培养;
细胞培养后,通过光场照射处理,使吸附在基板表面的质粒或质粒/载体复合物快速释放,从而被细胞摄入,完成基因传递及表达;
所述的p+/n型硅基板中硼原子扩散深度为200-400nm,扩散浓度为1×1018~1×1020原子/cm2;或所述的n+/p型硅基板中磷元素扩散深度为100nm,扩散浓度为5×1015原子/cm2;
所述的光场照射处理过程为:用波长为400~700nm的可见光从基因承载平台的表面照射,照射10分钟,光照强度50~100mw/cm2。
2.一种用于基因转染中可光场调控基因快速释放的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以具有光伏效应的p+/n型或n+/p型硅基板表面作为基因承载平台,在硅基板上吸附质粒或质粒/载体复合物,然后进行细胞培养;
细胞培养后,通过光场照射处理,使吸附在基板表面的质粒或质粒/载体复合物快速释放,从而被细胞摄入,完成基因传递及表达;
所述的p+/n型硅基板中硼原子扩散深度为200nm,扩散浓度为1×1018原子/cm2;或所述的n+/p型硅基板中磷元素扩散深度为200-300nm,扩散浓度为1×1016~1×1017原子/cm2;
在所述的硅基板上先制备一层具有良好生物相容性的聚合物薄膜层,再作为基因承载平台,在其上吸附质粒或质粒/载体复合物,进行细胞培养;其中在所述的p+/n型硅基板表面制备正电性的聚合物薄膜层,在所述的n+/p型硅基板表面制备负电性的聚合物薄膜层;
所述的光场照射处理过程为:用波长为400~700nm的可见光从基因承载平台的表面照射,照射10~20分钟,光照强度30~100mw/cm2;或用波长为300~400nm的紫外光从基因承载平台的表面照射,照射20分钟,光场强度为2mw/cm2。
3.如权利要求2所述的用于基因转染中可光场调控基因快速释放的方法,其特征在于,所述正电性的聚合物为聚乙烯亚胺(PEI)、壳聚糖、聚赖氨酸或聚精氨酸;所述的负电性的聚合物为聚组氨酸、聚丙烯酸、牛血清白蛋白、聚苯乙烯磺酸钠或聚谷氨酸。
4.如权利要求1或2所述的用于基因转染中可光场调控基因快速释放的方法,其特征在于,所述的质粒/载体复合物中载体为阳离子脂质体、金纳米颗粒、金纳米棒或聚多肽。
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