[发明专利]一种骨肽提取方法在审
| 申请号: | 201710848556.X | 申请日: | 2017-09-19 |
| 公开(公告)号: | CN107418992A | 公开(公告)日: | 2017-12-01 |
| 发明(设计)人: | 王峰云;潘庆;苏燕玲 | 申请(专利权)人: | 广东雅道生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
| 代理公司: | 北京精金石专利代理事务所(普通合伙)11470 | 代理人: | 黄福伟 |
| 地址: | 526238 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 提取 方法 | ||
1.一种骨肽提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将动物骨头去除骨膜后碾碎,取出骨髓;
步骤2:将骨髓分散到6-8倍骨髓重量的水中在36℃-38℃的恒温水浴中通过超声处理使骨髓细胞破裂,超声频率为250-300KHz;
步骤3:将步骤2处理得到的混合物进行微波加热处理,微波加热处理时间为4-5min,微波频率为2300-2400MHz;混合物加热后的温度为75-80℃;
步骤4:将步骤3处理得到的混合物冷却至室温后加入霉菌蛋白酶、杆菌蛋白酶复合酶水解3-6h,水解温度为45-47℃,水解结束后对蛋白酶高温灭活;霉菌蛋白酶的用量为2000U/g骨髓,杆菌蛋白酶的用量为4000U/g骨髓;
步骤5:将步骤4得到的混合物通过降温、离心后得到上清液;
步骤6:将上清液经过后处理得到骨肽。
2.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,步骤1中还包括对取出的骨髓通过有机溶剂萃取分离油脂。
3.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,所述的萃取溶剂为正己烷、异丙醇、石油醚、DMSO中之一或任意两种组合。
4.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,步骤4中,水解前调节混合物的pH值为7.5-8。
5.根据权利要求4所述的骨肽提取方法,其特征在于,调节pH值所用的酸为有机酸,所述的有机酸为草酸、柠檬酸、乳酸、乙酸中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,步骤2中超声处理时间为30-60s。
7.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,步骤3中,微波处理时,反应器中的真空度为-43Kpa~-49Kpa。
8.根据权利要求1所述的骨肽提取方法,其特征在于,所述的步骤6具体为:通过透析处理得到分子量小于8000的外透液,将外透液真空浓缩;将浓缩液冷冻至4℃后,加入5倍浓缩液体积的-20℃的丙酮,静置一段时间后过滤,并通过真空喷雾干燥得到骨肽。
9.根据权利要求8所述的骨肽提取方法,其特征在于,所述的喷雾干燥时,进风温度控制在110-160℃,出风温度控制在60-85℃。
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