[发明专利]一种利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法

权利要求书

1.一种利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，所述的复配菌剂包括海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11与海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2，包括以下步骤：

(1)将海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11与海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2的菌种分别接种到固体培养基上培养，加入无菌水制成GHF11菌种液与GHF2菌种液；

(2)两种菌种液混合得到混合菌液，然后接种到液体培养基中发酵培养制成发酵菌液；

(3)将发酵菌液透析去除部分培养基成份后离心得上清液，再加入乙醇静置沉降、离心分离得粗提产物；

(4)将粗提产物溶于水中得到粗产品溶液，加入乙醇静置沉降，然后离心分离沉降物并干燥得到精提产物；

(5)将精提产物溶于琼脂与淀粉的混合水溶液中，再冷却凝固制成重金属高效吸附剂；

所述海洋盐单胞菌菌株Halomonas sp.GHF11，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，中国科学院微生物研究所，保藏日期：2017年8月9日，保藏编号CGMCC No.：14510；建议的分类命名为大安盐单胞菌，拉丁文学名为Halomonas taeanensis；

所述的海洋冷杆菌菌株Psychrobacter sp.GHF2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，中国科学院微生物研究所，保藏日期：2017年8月9日，保藏编号CGMCC No.：14509；建议的分类命名为海水嗜冷杆菌，拉丁文学名为Psychrobacter aquimaris。

2.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，其特征在于，所述的液体培养基经以下过程制成：

a.将贝类海鲜产品用水清洗干净，按质量比贝类海鲜产品:水＝1:2～4加水在120～122℃高压蒸煮100～120分钟得到蒸煮肉汤；

b.蒸煮肉汤降温至50～60℃，加入枯草杆菌蛋白酶、菠萝蛋白酶酶解8～12小时，两种蛋白酶添加后的质量浓度为4‰～8‰，然后经400～500目筛网过滤得到酶解液；

c.在95～100℃下持续加热酶解液使体积浓缩30％～50％得到浓缩液；

d.向100mL浓缩液中加入磷酸氢二钾0.8～1.4g、葡萄糖25～45g溶解均匀，然后加入陈化海水定容到1L，经高压灭菌制成液体培养基；

固体培养基为向1L液体培养基中加入15～20g的琼脂凝固制成的斜面培养基。

3.根据权利要求2所述的利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，其特征在于，贝类海鲜产品为蛤仔、蛏子、蚬子、海虹、扇贝与贻贝中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，其特征在于，步骤(1)中海洋盐单胞菌菌株的培养温度为25～30℃，海洋冷杆菌菌株的培养温度为18～23℃，培养时间为36～48小时，无菌水与固体培养基的体积比为1.0～1.5:1。

5.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，其特征在于，步骤(2)中GHF11菌种液与GHF2菌种液体积比为0.5～2:1，混合菌液接种浓度为1.5～2.5mL混合菌液/100mL液体培养基，培养温度23～27℃、时间3～5天，摇床转速100～160r/min。

6.根据权利要求1所述的利用复配菌剂制备重金属高效吸附剂的方法，其特征在于，步骤(3)中发酵菌液透析去除部分培养基成份的过程如下：将发酵菌液置于旋转蒸发仪上，在60～65℃下减压浓缩至原体积的10％～15％，然后装入截留分子量为8000道尔顿的透析袋中用去离子水透析，至透析袋外侧的去离子水无色无味。