[发明专利]一种生物酶法去消旋化制备L-草铵膦的方法有效
| 申请号： | 201710834958.4 | 申请日： | 2017-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN107502647B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;周海胜;居述云;尹新坚;徐刚;吴坚平 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12P41/00 | 分类号： | C12P41/00;C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生物酶 法去消旋化 制备 草铵膦 方法 | ||
1.一种生物酶法去消旋化制备L-草铵膦的方法，以D,L-草铵膦为原料，经酶催化体系催化获得L-草铵膦，其特征在于，所述酶催化体系为一锅化的多酶催化体系，由D-氨基酸氧化酶、氨基酸脱氢酶和辅酶再生系统组成；所述D-氨基酸氧化酶来源于粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)OR74A，NCBI登录号为XP_964990.2；所述氨基酸脱氢酶为谷氨酸脱氢酶。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸脱氢酶来源于Pseudomonasentomophila str.L48、Pseudomonas putida KT2440或Bordetella prtrii DSM12804。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述辅酶再生系统为：以葡萄糖脱氢酶为辅酶再生酶、以葡萄糖为辅酶再生底物、包含NAD(P)H和NAD(P)+的葡萄糖脱氢酶辅酶再生系统；或，以醇脱氢酶为辅酶再生酶、以异丙醇为辅酶再生底物、包含NAD(P)H和NAD(P)+的醇脱氢酶辅酶再生系统；或者，以甲酸脱氢酶为辅酶再生酶、以甲酸盐为辅酶再生底物、包含NAD(P)H和NAD(P)+的甲酸脱氢酶辅酶再生系统。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶来源于巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)DSM319；所述醇脱氢酶为来源于乳酸杆菌(Lactobacilluskefiri)DSM20587；所述甲酸脱氢酶为来源于博伊丁假丝酵母Candida boidinii。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，催化体系中，所述D-氨基酸氧化酶的添加量为0.1～100U/L；所述氨基酸脱氢酶的添加量为0.1～100U/L；所述辅酶再生酶的添加量为0.1～100U/L。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，催化体系中，反应的温度为20～70℃，时间为6～96h。
7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，催化体系中，反应的pH值为6～9。
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