[发明专利]一种检测啶虫脒的电化学传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，包括检测电极和匹配试剂，所述检测电极包括金电极和由内至外依次包裹在所述金电极外的二氢硫辛酸活化层、啶虫脒抗体层和巯基己醇封闭层；

所述匹配试剂包括啶虫脒半抗原探针溶液和亚甲基蓝探针溶液。

2.根据权利要求1所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述啶虫脒半抗原探针溶液浓度为5~10μmol/L。

3.根据权利要求1所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述啶虫脒半抗原探针是利用混合酸酐法将啶虫脒半抗原与氨基化探针偶联获得的，所述氨基化探针的序列如下：NH₂-TTTTTAGCATCGGACA。

4.根据权利要求1所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述亚甲基蓝探针的核苷酸序列如下：TGTCCGATGCTAAAAA-MB。

5.根据权利要求1所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述亚甲基蓝探针溶液的浓度为5~15μM。

6.根据权利要求1所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述二氢硫辛酸活化层是由二氢硫辛酸中的S与金电极表面通过Au-S键组装形成。

7.权利要求1或6所述检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述检测电极的制备方法包括以下步骤：

1)将清洁后的金电极浸泡于二氢硫酸锌的乙醇溶液，进行Au-S键自组装，在所述金电极表面形成二氢硫酸锌自组装层；

2)在所述步骤1)中获得的二氢硫酸锌自组装层表面包覆含NHS和EDC的MES缓冲液，对所述二氢硫酸锌自组装层进行修饰活化，在所述金电极表面形成二氢硫辛酸活化层；

3)在所述二氢硫酸锌活化层表面包覆啶虫脒捕获抗体溶液进行孵育，在所述二氢硫酸锌活化层外表面形成啶虫脒抗体层；

4)在所述啶虫脒抗体层外表面包覆MCH溶液进行封闭，在所述啶虫脒抗体层外表面形成MCH封闭层，得到检测电极。

8.根据权利要求7所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，步骤1)中所述二氢硫辛酸的乙醇溶液的浓度为0.8~1.2mmol/L；所述浸泡的时间为1.5~2.5h。

9.根据权利要求7所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，步骤3)所述含NHS和EDC的MES缓冲液的pH值为6.4~6.6；所述缓冲液中MES的浓度为0.09~0.11mol/L；NHS的浓度为4.5~5.5mmol/L；EDC的浓度为2.0~3.0mmol/L。

10.根据权利要求7所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，步骤4)中所述捕获抗体溶液的浓度为8~12μgmL^-1；所述孵育的时间为1.5~2.5h。

11.根据权利要求7所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，所述孵育后还包括：对所述孵育得到的修饰层采用PBS洗涤，得到啶虫脒抗体层。

12.根据权利要求7所述的检测啶虫脒的电化学传感器，其特征在于，步骤5)中所述MCH溶液的浓度为1.5~2.5mmol/L；所述封闭的时间为25~35min。

13.权利要求1~12任意一项所述的电化学传感器在检测啶虫脒中的应用。

14.根据权利要求13所述的应用，所述检测包括以下步骤：

A)将待检样品和半抗原探针的混合液修饰检测电极表面，获得待检电极；

B)向所述待检电极表面滴加亚甲基蓝探针溶液，所述亚甲基蓝探针溶液与半抗原探针互补修饰，获得带信号电极；

C)以所述带信号电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，Pt电极为对电极，进行差分脉冲伏安检测，根据得到的电信号和预定的标准曲线，得到所述待检样品中啶虫脒的含量。