[发明专利]一种日中性草莓组培快繁培养基及组培快繁方法有效
申请号: | 201710833679.6 | 申请日: | 2017-09-15 |
公开(公告)号: | CN107333659B | 公开(公告)日: | 2019-01-22 |
发明(设计)人: | 王静 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12N5/02;A01H4/00 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 中性 草莓 组培快繁 培养基 方法 | ||
1.一种日中性草莓组培快繁培养基,包括:
1)芽诱导培养基,所述芽诱导培养基以MS固体培养基为基准,包括质量浓度为2~3.5%的蔗糖、2.8~3.5mg/L的BA和0.2~0.4mg/L的IBA;
2)芽伸长培养基,所述芽伸长培养基以MS固体培养基为基准,包括质量浓度为2~3.5%的蔗糖、1.6~1.8mg/L的BA和0.1~0.2mg/L的IBA;
3)增殖培养基,所述增殖培养基以MS固体培养基为基准,包括质量浓度为2~3.5%的蔗糖和0.65~0.85mg/L的BA;
4)生根培养基,所述生根培养基以1/2MS固体培养基为基准,包括质量浓度为0.5~3%的葡萄糖和0.002~0.005mg/L的IBA。
2.基于权利要求1所述培养基的日中性草莓快速繁殖方法,包括以下步骤:
1)选择日中性草莓叶片或冠茎基部的隐芽作为外植体;
2)将步骤1)得到的外植体依次进行乙醇灭菌和次氯酸钠灭菌,得到灭菌外植体;
3)将所述步骤2)得到的灭菌外植体置于芽诱导培养基中进行芽诱导培养,得到草莓幼芽;
4)当所述草莓幼芽长至0.3~0.5cm时,将步骤3)得到的草莓幼芽置于芽伸长培养基中进行幼苗培养,得到伸长的幼苗;
5)当幼苗长至为1~3cm时,将步骤4)得到的伸长的幼苗芽置于增殖培养基中进行增殖培养,得到草莓扩繁幼苗;
6)步骤5)得到的草莓扩繁幼苗长至3~5cm时,将所述草莓扩繁幼苗在生根培养基中进行生根培养,得到扩繁生根的草莓幼苗;
7)待不定根长至2.0cm以上时,将步骤6)得到的扩繁生根的草莓幼苗进行炼苗和移栽;
所述步骤3)~6)的培养条件独立地为无菌环境,培养温度为24±2℃,光照强度为1500~2000Lx,每日光照时间14h;
所述选取叶片作为外植体时,芽诱导培养前还包括:将灭菌叶片进行愈伤诱导培养,所述愈伤诱导培养为暗培养;
所述愈伤诱导培养用愈伤诱导培养基包括B5固体培养基、2.8~3.5mg/L的BA和0.2~0.4mg/L的IBA和质量浓度为2~3.5%的蔗糖,所述愈伤诱导培养基的pH值为5.8~6.0。
3.根据权利要求2所述的繁殖方法,其特征在于,步骤2)灭菌前还包括:将外植体进行预处理,所述预处理包括以下步骤:将外植体在碱性洗涤剂中浸泡20~40min,用水冲洗5~6次。
4.根据权利要求2所述的繁殖方法,其特征在于,所述步骤2)灭菌包括以下步骤:用体积浓度为70~75%乙醇浸泡10~20s,再用质量浓度为0.8%~3%次氯酸钠进行表面消毒10~15min。
5.根据权利要求2所述的繁殖方法,其特征在于,选取叶片作为外植体时,将叶片沿叶脉处纵向倾斜30~60°角斜切成块,块10~20mm长,7~10mm宽。
6.根据权利要求2所述的繁殖方法,其特征在于,所述步骤5)增殖培养中,继代的间隔时间为20~25d。
7.根据权利要求2所述的繁殖方法,其特征在于,所述移栽用基质包括质量比为(2~4):1:1的泥炭、珍珠岩和蛭石,基质的湿度为85~95%。
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