[发明专利]一种从辣椒果实中分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法

说明书

本发明公开了一种从辣椒果实中分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法。该方法包括以下步骤：辣椒果实经超临界二氧化碳提取，减压浓缩后得到辣椒油树脂；辣椒油树脂经过甲醇溶液萃取和碱提酸沉后，得到富含辣椒碱和二氢辣椒碱的辣椒碱类物质晶体；以正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水为溶剂体系，采用高速逆流色谱法制备，用高效液相色谱监测纯度，依据HSCCC色谱图合并纯度较高的洗脱液，经减压浓缩和真空干燥后，得到纯度大于97.0%的辣椒碱和纯度大于96.0%的二氢辣椒碱，且两者的提取效率均大于93%，回收率均大于70%。本发明对辣椒籽充分利用，操作简便、成本低、重复性好、效率高，产品纯度高，可用于规模化生产。

技术领域

本发明属于天然药物提取技术领域，更具体地，涉及一种从辣椒果实中分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法。

背景技术

辣椒为茄科植物辣椒(Capsicum frutescens L.)的干燥果实，是一种广泛使用的辛辣调味品。辣椒也可作为一味中药，常用于治疗寒滞腹痛、呕吐和冻疮等。辣椒碱类物质(Capsaicinoids)是辣椒中引起辛辣的成分，其中辣椒碱(capsaicin，CA)和二氢辣椒碱(dihydrocapsaicin，DHCA)的含量约为90％，在2015版《中国药典》中辣椒碱和二氢辣椒碱作为辣椒的指标成分，用于质量控制。辣椒碱类物质具有多种药理作用，例如镇痛抗炎、对感觉神经纤维和感觉功能以及神经递质的选择性作用等。同时，还可作为食品添加剂和防腐剂，广泛应用于医药、农药、军事等领域。

目前辣椒碱类物质的提取方法主要为有机溶剂萃取法和超临界二氧化碳萃取法，原料多为辣椒皮粉，没有对辣椒籽充分利用。辣椒提取物是含有多种物质的红色油状物，因此又称辣椒油树脂，其中辣椒碱类物质含量仅为2％～10％，故其富集和纯化过程比较困难及复杂，提取率和分离纯化效率较低。辣椒碱类物质的纯化方法通常为柱色谱技术联用，例如大孔吸附树脂、硅胶柱层析、离子交换色谱和高效液相制备色谱等，但由于辣椒生物碱各组分之间的结构非常相似，常规的分离方法无法将其分开。另外，这些方法对固体填料依赖性高，而固体填料的使用次数有限、使用寿命较短，致使生产成本较高，难以规模化生产。因此，研发一套简单可行的提取、富集、纯化方案对提高辣椒果实中辣椒碱和二氢辣椒碱的利用率具有非常重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有辣椒碱类物质提取率和分离纯化效率较低的不足，提供一种提取效率高、分离时间短、分离效果好、产品纯度高(纯度>95％)的从辣椒果实中分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法。

本发明的目的是提供一种从辣椒果实中分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种分离纯化辣椒碱和二氢辣椒碱的方法，包括以下步骤：

S1.超临界二氧化碳提取：将辣椒果实粉碎后过筛，经超临界二氧化碳流体萃取，得到辣椒油树脂；

S2.甲醇溶液萃取：将所述辣椒油树脂与甲醇-水溶液混合，超声，离心，浓缩，得到含辣椒碱和二氢辣椒碱的油状物；

S3.碱提酸沉结晶：用pH为10～14的碱溶液溶解所述油状物，再用酸调节pH至4～8，0～10℃结晶1～24h，抽滤，洗涤，干燥，得到辣椒碱类物质结晶；

S4.连续进样进行高速逆流色谱分离。

优选地，步骤S1中，萃取压力为10～50MPa，萃取温度为10～50℃，乙醇夹带剂用量为10～150mL，萃取时间为30～150min。

优选地，步骤S1中，解析釜压力为4～9MPa，解析釜温度为40～65℃。

优选地，步骤S1中，CO₂冷却至4℃后，以5～30L/h流速泵入系统。